慢性関節リウマチ患者滑膜細胞におけるトロニボキサンA_2の役割

多伏克星A_2对类风湿性关节炎患者滑膜细胞的作用

• 批准号: 13770244
• 负责人: 淺沼 ゆう
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: St. Marianna University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770244/
• 关键词: 慢性関節リウマチ; トロンボキサンA_2; トロンボキサンA_2受容体; 変形性関節症; 滑膜細胞

トロンボキサン(Thromboxane : TX)A_2は,血小板凝集や血管平滑筋収縮作用などで知られるアラキドン酸代謝産物である。最近,TXA_2の免疫系での役割が注目されている。そこで、慢性関節リウマチ(RA)の病態形成にTXA_2が及ぼす作用を明らかにするため,RA滑膜細胞で検討した。本研究は本学生命倫理委員会の承認を得た上で、患者から文書によるインフォームドコンセントを得て実施した。RA6例および変形性膝関節症(OA)4例の滑膜細胞から総RNAを抽出し,TXA_2受容体mRNA発現の有無をRT-PCR法により解析した。RA滑膜細胞ではOAに比べてTXA_2受容体mRNAの発現を強く認めた。さらに、PCR産物をダイレクトシークエンス法にて確認した結果、既知のTXA_2受容体cDNAシークエンス配列と一致した。次に、RAおよびOA滑膜組織でのTXA_2受容体発現をin situ hybridization法により確認したところ、RA滑膜組織では、滑膜表層細胞、線維芽細胞、血管内皮細胞にTXA2受容体の陽性信号を強く認めたが、OAでは滑膜表層細胞に非常に弱い陽性信号を認めるのみであった。RA滑膜細胞および組織にてTXA_2受容体mRNAの発現が認められたことから、その発現を調節する因子についても検討した。RA滑膜細胞をIL-1またはTNF-αで刺激して、24時間後に総RNAを抽出してRT-PCRを行った結果、未刺激の場合と比較してTXA_2受容体mRNAの発現が亢進していた。また、TXA_2 agonistのU46619は、TNF-αで刺激したRA滑膜細胞の増殖を抑制した。以上より、本研究によりRA滑膜細胞でのTXA_2受容体の存在が明らかとなり、RAの病態においてTXA_2がこれまで知られていない生理活性をもつことが示された。

Thromboxane (TX)A_2 is a platelet aggregation and vascular smooth muscle contraction. Recently, the immune system of TXA_2 has become more and more important. The role of TXA_2 in the pathogenesis of chronic arthritis (RA) is also discussed. This study was carried out in accordance with the approval of the Bioethics Committee of the University and with the approval of the patients. RNA was extracted from synovial cells of 6 RA patients with knee osteoarthritis (OA) and analyzed by RT-PCR. RA synovial cells are more sensitive to OA than TXA_2 receptor mRNA. The PCR products were confirmed by PCR and the cDNA sequences of TXA_2 receptors were identical. TXA_2 receptor expression in synovial tissue of RA and OA was confirmed by situ hybridization method. TXA_2 receptor expression in synovial tissue of RA and OA was strongly recognized by synovial surface cells, vascular bud cells and vascular endothelial cells. The expression of TXA_2 receptor mRNA in RA synovial cells and tissues was identified by factors that regulate its expression. The expression of TXA_2 receptor mRNA in RA synovial cells was increased after IL-1 and TNF-α stimulation and after 24 hours of RT-PCR. TXA_2 agonist U46619 inhibits proliferation of RA synovial cells stimulated by TNF-α. In this study, the existence of TXA_2 receptor in RA synovial cells was clearly demonstrated, and the physiological activity of TXA_2 in RA was clearly demonstrated.

项目成果

Asanuma Y, Nagai K, Kato M, Sugiura H, Kawai S: "Weekly pulse therapy of methotrexate improves survival compared with daily administration in MRL/lpr mice"Eur J Pharmacol. 435・2-3. 253-258 (2002)

Asanuma Y、Nagai K、Kato M、Sugiura H、Kawai S：“与每天施用 MRL/lpr 小鼠相比，每周施用甲氨蝶呤可提高生存率”Eur J Pharmacol 435・2-258 (2002)。

淺沼ゆう, 鏑木淳一, 川合眞一: "脂質代謝異常とリウマチ性疾患の血管病変"炎症と免疫. 9・2. 165-172 (2001)

Yu Asanuma、Junichi Kaburagi、Shinichi Kawai：“风湿病中的脂质代谢异常和血管病变”炎症和免疫学 165-172（2001）。

淺沼ゆう, 川合眞一: "慢性関節リウマチの薬物療法のスタンダード"Expert Nurse. 17・9. 22-24 (2001)

Yu Asanuma、Shinichi Kawai：“慢性类风湿性关节炎的药物治疗标准”专家护士 17・9（2001 年）。