脊髄小脳失調症6型における神経細胞死と核転写因子

脊髓小脑共济失调 6 型中的神经元死亡和核转录因子

• 批准号: 13770318
• 负责人: 大和田 潔
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770318/
• 关键词: 脊髄小脳失調症6型; 核転写因子; 神経細胞死

我々はこれまでポリグルタミン数の異なるヒト全長alpha 1aカルシュウムチャンネルを持続的に発現する細胞系列において、細胞死の解析を続けてきた。他のいわゆるポリグルタミン病においては、ポリグルタミン数の延長が核転写因子の機能異常をきたし、細胞死を誘導することが報告されてきた。今回、本奨励研究Aにより、我々はルシフェラーゼアッセイ系を用いた核転写因子測定系を確立できた。細胞系列によって、適切な条件決めが必要なためそのアッセイは難しく、難儀したが、トランスフェクトするDNA量とリポフェクト法の試薬量の至適値を決定、核転写因子活性を安定してアッセイすることが出来るようになった。この系を用い、すでに細胞死をひき起こしやすいことが確認されているポリグルタミン鎖が長い細胞系列と正常のポリグルタミン鎖数における血清除去による細胞死誘導下における核転写因子AP1, CRE, NFkB, SRF, p53, NFAT, SREにおいて測定した。その結果、血清除去下では、各々の核転写因子が様々な挙動をしめすことが確認された。特にNFATはポリグルタミン鎖数が長い細胞系列で優位な差を持って上昇していた。しかしながら、その上昇はわずかな上昇で、それが細胞死にどのような影響を与えているのか、現在確認中である。NFATはカルシニューリンを介した系であり、現在、カルシニューリン活性阻害薬投与後のNFATの活性化などを計測中である。今後、細胞内シグナルを介した核転写因子について、実験を続けていく予定である。

We have been working on the analysis of cell death in the discovered cell series based on this unique, full-length alpha 1a cell array. The number of nuclear factors in the cell is increased and the cell death is induced. In this paper, the author studies the relationship between the two factors. Cell series, appropriate conditions, determination of the amount of DNA, determination of the appropriate amount of DNA, determination of the activity of nuclear factors, stabilization of the activity of nuclear factors, determination of the amount of DNA, determination of the appropriate amount of DNA, determination of the appropriate amount of DNA, determination of the activity of nuclear factors, determination of the activity of nuclear factors. This system is used to determine the expression of AP1, CRE, NFkB, SRF, p53, NFAT, SRE in the presence of cell death. The results, serum removal, and each of the nuclear factors were confirmed. The number of locks in the NFAT is increasing.しかしながら、その上升はわずかな上升で、それが细胞死にどのような影响を与えているのか、现在确认中である。NFAT is active in the measurement of NFAT activity after injection. In the future, intracellular factors will be determined in the future.