高分子複合抗腫瘍薬の殺細胞効果発現におけるGST-πの関与

GST-π参与高分子复合物抗肿瘤药物细胞杀伤作用表达

• 批准号: 13770678
• 负责人: 田代 健一
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770678/
• 关键词: GST-π; グルタチオン; ドキソルビシン; 高分子複合抗腫瘍薬; 抗癌剤耐性

高分子複合抗腫瘍薬の殺細胞効果発現におけるGST-πの関与についての検討を行い、本年度は以下の実験結果、成果を認めた。1)高分子複合体抗腫瘍薬の精製グルタチオン(GSH)とドキソルビシン(DXR)をグルタルアルデヒドを介して共有結合させ、高分子複合体(GSH-DXR)を生成した。さらにこれをDowex50カラムを用いて精製した。2)培養細胞の選定実験で用いる細胞は、GST-πの発現していないものとGST-πの発現しているものがそれぞれ必要とされる。予備実験の結果からGST-πの発現していないヒト肝癌細胞HepG2、発現しているヒト胃癌細胞HT29を選定し、10%ウシ胎児血清を含むDMEM及びRPMI1640で培養した。3)殺細胞効果の測定DXRおよびGSH-DXRを各細胞に96時間持続暴露し、MTT法にて生細胞数を測定した。HepG2、HT29のいずれも、DXRに比べGSH-DXRの殺細胞効果が強く認められたが、GST-πの発現していないHepG2がHT29に比べ有意に強く効果が認められた。したがってGST-πの発現が耐性に強く関与することが確認され、また単剤のDXRに比べGSH-DXRの抗腫瘍効果の増強が認められた。4)アポトーシス誘導能の検討各細胞についてDNAの断片化をアガロース電気泳動で、カスパーゼ3活性をAsp-Gt-Val-Asp-MCAを基質として測定を行い、現在検討中である。

GST-π-related research on the development of cytocidal effects of polymer complex anti-tumor agents is under way. The following results and achievements are recognized this year. 1)Polymer Complex Anti-tumor Drug Purification and Synthesis of GSH-DXR Today's Dowex50 series is refined with Chinese. 2)The selection of cultured cells is necessary for the production of GST-π. The results showed that GST-π was detected in HepG2 cells and HT29 cells, and 10% fetal serum was cultured in DMEM and RPMI1640. 3)The number of viable cells was determined by MTT assay after 96 hours of exposure to DXR and GSH-DXR. HepG2, HT29 and DXR are more potent than GSH-DXR in killing cells, and GST-π is more potent than HT29 in killing cells. GST-DXR has been recognized as a more effective anti-tumor agent than DXR. 4) DNA fragmentation, DNA electromigration, Asp-Gt-Val-Asp-MCA activity, matrix induction and assay in each cell.