血管新生を標的とした消化器癌腹膜播種性転移に対する遺伝子治療

靶向血管生成的胃肠癌腹膜播散转移基因治疗

• 批准号: 13770703
• 负责人: 藤原 斉
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770703/
• 关键词: 腹膜播種性転移; 遺伝子治療; 血管新生抑制; 乳斑; GFP; アデノウイルスベクター; HGF; NK4; 微小腹膜播種性転移; 腹膜リンパ組織

1 ヒト胃癌細胞株MKN45を用いたヌードマウス腹膜転移モデルに対して、NK4発現アデノウイルスベクターを腹腔内投与したところ、予め、同ベククーを投与した後、癌細胞を接種する予防投与にて、強力な腹膜転移の抑制と生存延長効果が得られた。腹腔および全身におけるNK4蛋白の発現をELISAにて定量したところ、癌細胞の初期転移形成部位である腹膜乳斑における選択的かつ高濃度のNK4発現が得られた。GFP発現アデノウイルスベクターおよび微粒子活性炭の投与実験により、乳斑の主たる構成細胞であるマクロファージが、アデノウイルス感染に伴うNK4発現細胞であることを明らかにした。また、NK4による転移抑制機序を明らかにするため、予めアデノウイルスベクター投与により乳斑でNK4を発現させた後、GFP発現MKN45細胞を腹腔接種し、大網乳斑における癌細胞の集積着床をFACSにて定量し、コントロールと比較した。その結果、NK4群において集積着床の有意の抑制が認められ、乳斑NK4発現による浸潤および血管新生の抑制により強力な転移形成の抑制が得られた可能性を明らかにした。アデノウイルスベクターを用いた腹膜転移予防のための腹腔内標的遺伝子療法の可能性が示唆された。2 NK4発現マウス大腸癌細胞株CT26-NK4を作成し、同系マウス皮下移植モデルを用いてNK4の抗腫瘍機序について詳細に検討した。NK4を発現しないコントロール細胞(CT26)に比較して強力な造腫瘍性の抑制が得られ、組織学的検討により、CT26-NK4群において、新生血管数の減少とアポトーシス細胞の増加が認められ、血管新生の抑制が抗腫瘍作用に深く関与することを明らかにした。

1 ヒ ト gastric cancer cell lines MKN45 を with い た ヌ ー ド マ ウ ス peritoneal planning move モ デ ル に し seaborne て, NK4 発 now ア デ ノ ウ イ ル ス ベ ク タ ー を cast with intraperitoneal し た と こ ろ, め, ベ ク ク ー を cast with し, cancer cells after た を vaccination す る to prevent cast with に て, powerful な peritoneal planning move の suppression と prolong survival fruit comes unseen が ら れ た. Abdominal お よ び systemic に お け る NK4 protein の 発 now を ELISA に て quantitative し た と こ ろ and planning to move form early cancer cells の で あ る peritoneal milk spot に お け る sentaku of か つ high-concentration の NK4 発 が must now ら れ た. GFP 発 now ア デ ノ ウ イ ル ス ベ ク タ ー お よ び の cast with activated carbon particles be 験 に よ り, milk spot の main た る component cells で あ る マ ク ロ フ ァ ー ジ が, ア デ ノ ウ イ ル に ス infection with う NK4 発 now cells で あ る こ と を Ming ら か に し た. ま た, NK4 に よ る planning moving inhibit machine sequence を Ming ら か に す る た め, to め ア デ ノ ウ イ ル ス ベ ク タ ー cast with に よ り milk spot で NK4 を 発 now さ せ た, GFP 発 now MKN45 cells を intraperitoneal inoculation し, net milk spot に お け る cancer の set product implantation を both FACS に て quantitative し, コ ン ト ロ ー ル と compare し た. そ の results, NK4 group に お い て set product implantation の intentionally の inhibit が recognize め ら れ, milk spot NK4 発 now に よ る infiltrating お よ び の angiogenesis inhibiting に よ り powerful な planning to move form の suppress が may ら れ た possibility を Ming ら か に し た. ア デ ノ ウ イ ル ス ベ ク タ ー を with い た peritoneal planning to move to prevent の た め の intra-abdominal mark heritage 伝 child therapy が の possibility in stopping さ れ た. 2 NK4 発 now マ ウ ス CT26 colorectal cancer cell lines - NK4 を make し, homologous マ ウ ス subcutaneous transplantation モ デ ル を with い て NK4 の resistance swollen sores machine sequence に つ い て detailed に beg し 検 た. NK4 を 発 now し な い コ ン ト ロ ー ル cells (CT26) に comparative し て made swollen sores sex strong な の suppress が may ら れ, histological beg に 検 よ り, CT26 - NK4 group に お い て, the number of new blood vessels の reduce と ア ポ ト ー シ ス cells の raised plus が recognize め ら れ, suppression angiogenesis の が swollen sores に deep く masato and す る こ と を Ming ら か に Youdaoplaceholder0 た.

项目成果

H.Fujiwara: "Suppression of peritoneal micrometastases by adenovirus-mediated antiangiogenic gene transfer in mice"XXXIII World congress of the international college of surgeons. 29-31 (2002)

H.Fujiwara：“通过腺病毒介导的小鼠抗血管生成基因转移抑制腹膜微转移”第 33 届国际外科医生学会世界大会。

窪田 健: "マウス大腸癌細胞株(CT26)を用いたNK4遺伝子治療の検討"癌と化学療法. 29・12. 2258-2260 (2002)

Ken Kubota：“使用小鼠结肠癌细胞系（CT26）进行 NK4 基因治疗的研究”《癌症与化疗》29・12（2002 年）。

山岸 久一: "Sentinel Node Navigation癌治療への新しい展開(分担) がん集学的治療とSNNS"金原出版. 5 (2002)

Hisakazu Yamagishi：“前哨节点导航癌症治疗的新进展（共享）癌症多学科治疗和 SNNS”Kanehara Publishing 5（2002）。

藤原 斉: "腹膜リンパ組織の特性に基づく癌微小転移に対する標的遺伝子治療"癌と化学療法. 29・12. 2322-2324 (2002)

藤原仁：“基于腹膜淋巴组织特征的癌症微转移的靶向基因治疗”《癌症与化疗》29・12（2002）。

T.Kubota: "Antitumor activities of genetically modified colon cancer cells expressing HGF/NK4"XXXIII World congress of the international college of surgeons. 47-50 (2002)

T.Kubota：“表达 HGF/NK4 的转基因结肠癌细胞的抗肿瘤活性”第 33 届国际外科医生学会世界大会。