樹状細胞を用いた抗腫瘍効果に関する基礎的解析

树突状细胞抗肿瘤作用的基础分析

• 批准号: 13770718
• 负责人: 橋本 雅彦
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770718/
• 关键词: 樹状細胞; 抗腫瘍効果

macrophage-chemotactic protein-1(MCP-1)には単球系の細胞やリンパ球に対する炎症部位への走化作用がある。われわれのこれまでの実験で、担癌マウスの所属リンパ節にはMCP-1の発現が認められなかったことを確認している。今回われわれは、マウス大腿骨より骨髄細胞(BM)を採取し、24穴プレートを用いて、5×10^5個/wellのBMをGM-CSF 500U/mlを添加したRPMI1640で、2週間培養して樹状細胞(DC)を誘導した。この間、経時的にこの培養細胞からRNAを抽出し、RT-PCR法によりMCP-1とmacrophage-inflammatory protein(MIP)、IL-12の発現を検索した。同時に、培養上清中のMCP、IL-12量をELISA法を用いて経時的に測定した。BMから誘導されたDCはRT-PCRのレベルで、MCP-1、MIP、IL-12の発現が認められた。MCP-1、MIPの発現は、IL-12に比べ著明であった。培養上清にMCP-1は100pg/mlレベルでの産生が認められたが、IL-12は検出されなかった。培養上清のMCP-1産生量は培養開始後12〜14日目に最も多かった。DCには強いMCPの発現が認められたことから、腫瘍免疫の際にDCを付加した場合の抗腫瘍効果が誘導されるメカニズムの一つに、DCのMCP分泌による免疫系細胞の動員が示唆された。またMCP-1の観点からは、DCの培養は12日から14日目のものがより効果的ではないかと思われた。

Macrophage-chemotherapeutic protein-1(MCP-1) plays an important role in the transformation of inflammatory sites in cell lines. The discovery of MCP-1 is confirmed by the identification of the target species. In the present study, bone marrow cells (BM) were cultured in 24-hole culture medium with 5×10^5 BM/well and GM-CSF 500U/ml at RPMI1640. Dendritic cells (DC) were induced in 2-week culture. The expression of MCP-1, macrophage-inflammatory protein(MIP) and IL-12 in cultured cells was detected by RT-PCR. At the same time, MCP and IL-12 in culture supernatant were measured by ELISA. BM-induced DCs were detected by RT-PCR, MCP-1, MIP and IL-12. MCP-1, MIP and IL-12 are more common than MCP-1, MIP and IL-12. Culture supernatant MCP-1 was 100pg/ml and IL-12 was 100 pg/ml. MCP-1 production in culture supernatant was highest 12 ~ 14 days after culture. DC is strongly associated with MCP production, induction of anti-tumor effect, and mobilization of immune system cells. MCP-1 was cultured on the 12th day and DC on the 14th day.