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HIV腎症における腎不全発症機序の解明

HIV肾病肾衰竭机制的阐明

基本信息

批准号：
13770883
负责人：
丹司望
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770883/
关键词：
HIV-1 HIV腎症 in situ PCR 尿細管上皮系統発生的解析 HIV腎臓腎上皮細胞

项目摘要

前年度までの研究により、HIV-1 DNAのin situPCR法およびHIV-1 mRNAのin situ hybridization(ISH)法を確立しており、それら手技の他に系統発生的な解析を用いてHIV-1 quasispeciesの感染の有無を調べ、HIV-1ウィルス感染と腎不全発症の関連について検討した。まずISH法によりHIV腎症症例の上皮細胞内にHIV-1 gagとnef mRNAの存在することを証明した。さらにHIV腎症症例の腎生検組織よりレーザーマイクロダイセクション法を用いて、パラフィン切片より尿細管上皮細胞のみを採取、その組織からDNAを抽出し、nested PCR法でHIV-1 V3-loopやgp120-envelopの塩基配列を検出した。レーザーマイクロダイセクション法による間質細胞、特にT細胞混入の無きことを確認するために、その手技により得た組織より、TCR rear rangementが検出されないことをPCR法で確認し、HIV-1 V3-loopやgp120-envelopの塩基配列が尿細管上皮細胞由来であると判断した。腎組織より得られるウイルスのアミノ酸配列と、同じ患者の血液中の単核細胞より得たそれの系統発生的な解析を行うと、臓器特異的な進化を遂げていることが示唆され、腎組織に特有なHIV-1 quasispeciesの感染を示すものと思われた。これらの結果は、腎上皮細胞においてHIV-1特異的なproviral DNAやmRNAが検出された結果とともに、腎組織においてHIV-1の複製が行われていること、腎組織がHIV-1のリザーバーとしての機能を果たしうることを示すものとして重要である。

In the previous year, the HIV-1 DNA in situ PCR method and HIV-1 mRNA in situ hybridization(ISH) method were used to establish and analyze the presence or absence of HIV-1 quasispecies infection and the relationship between HIV-1 quasispecies infection and renal insufficiency. The ISH method was used to demonstrate the presence of HIV-1 gag and nef mRNA in epithelial cells of patients with HIV kidney disease. In recent years, HIV-1 V3-loop and gp120-envelop gene alignment has been detected by nested PCR in renal tissue samples obtained from HIV-1 patients. HIV-1 V3-loop and gp120-envelop were identified by PCR. The analysis of the systemic development of nuclear cells in the blood of patients with kidney tissue is based on the analysis of organ-specific evolution of HIV-1 quasispecies in kidney tissue. The results showed that HIV-1-specific proviral DNA and mRNA were detected in renal epithelial cells, and HIV-1 replication in renal tissues was important for the function of HIV-1.