下垂体LH、FSH産生・分泌機構における細胞内情報伝達機構の解明

阐明垂体LH和FSH产生和分泌机制中的细胞内信息传递机制

基本信息

批准号：
13770918
负责人：
金崎春彦
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Shimane Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770918/
关键词：
ゴナドトロピンドーパミン αT3-1細胞

项目摘要

下垂体プロラクチン産生細胞においてドーパミンはプロラクチン産生、分泌に対し負の制御を行っていることは良く知られている。この場合、ドーパミンD_2受容体に結合したドーパミンは、代表的なプロラクチン放出因子であるTRH刺激による細胞内カルシウムの上昇を抑制、あるいはPACAPの様にcAMP-プロテインキナーゼAを介して作用を有するアゴニストに対し、cAMP産生を抑制することで、プロラクチン産生、分泌を抑制していることが明らかとなっている。一方ドーパミンは視床下部GnRHニューロンに抑制的に働き、その為ゴナドトロピンの分泌が抑制されるという報告があるが、ドーパミンの下垂体ゴナドトロピン産生細胞に対する直接作用については不明である。我々はゴナドトロピン産生細胞におけるドーパミンの作用機序に関して検討するため、単一ゴナドトロピン産生細胞であるαT3-1細胞を用い、ゴナドトロピンα-subunitの発現に対するドーパミンD_2受容体の役割について検討した。刺激として作用機序の異なるGnRH及びPACAP38を用いた。RT-PCR及びWestern blottingによる検討でαT3-1細胞にはドーパミンD_2受容体が存在した。GnRH(100nM)刺激でα-subunit mRNA量は12時間後をピークに約2.5倍に増加した。PACAP38(100nM)では24時間後をピークに約2倍に増加した。もGnRH刺激によるα-subunit mRNAの増加はドーパミンD_2受容体アゴニストQinpiro1(10μM)存在下で変化を受けなかったが、PACAP38による刺激効果は有意に抑制された。ドーパミンD_2受容体はGnRH刺激に対する抑制効果は無いが、PACAP刺激に対してその抑制効果を持つ事を示しており、下垂体ゴナドトロピン産生細胞がドーパミンの影響下にあることが明らかとなった。

众所周知，多巴胺对垂体催乳素产生细胞的催乳素产生和分泌产生负面调节。在这种情况下，与多巴胺D_2受体结合的多巴胺抑制了TRH刺激引起的细胞内钙的升高，TRH刺激，典型的催乳素释放因子，或通过抑制催乳素的产生和通过cAMP蛋白激酶A的催化剂的分泌来抑制cAMP的产生，例如PACAP。另一方面，多巴胺对下丘脑GNRH神经元抑制作用，这抑制了促性腺激素的分泌，但尚不清楚多巴胺对垂体性促性腺激素产生细胞的直接作用是什么。为了研究多巴胺在促性腺激素产生细胞中的作用机理，我们使用了αT3-1细胞（一种产生促性腺激素的单个细胞）来研究多巴胺D_2受体对促性腺激素α-亚基酸促性腺激素表达的作用。具有不同作用机理的GnRH和PACAP38用作刺激。多巴胺D_2受体通过RT-PCR和Western印迹存在于αT3-1细胞中。 GnRH（100 nm）刺激增加了大约2.5倍后，α-亚基mRNA的量达到12小时。 PACAP38（100 nm）在24小时后达到峰值，增加了约两倍。尽管在多巴胺D_2受体激动剂Qinpiro1（10μM）存在下，GNRH刺激的α-亚基mRNA的增加并未改变，但PACAP38的刺激作用得到了显着抑制。尽管多巴胺D_2受体对GNRH刺激没有抑制作用，但它们表明它们对PACAP刺激具有抑制作用，表明垂体促性腺激素产生的细胞受多巴胺的影响。