子宮頚部上皮内癌に対するHP VE6/E7アンチセンス遺伝子治療の試み

HP VE6/E7反义基因治疗宫颈原位癌的试验

• 批准号: 13770916
• 负责人: 金森 康展
• 金额: $ 0.32万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770916/
• 关键词: 子宮頚癌; HPV; アンチセンスベクター; アポトーシス; 抗癌剤感受性

子宮頚癌とその初期病変である上皮内癌の大部分でHPV E6/E7タンパクの持続的な発現がみられ,それらは悪性形質の維持に必要とされている.HPV E6/E7アンチセンス遺伝子導入を行い,内因牲のE6/E7遺伝子発現の抑制を試みた.HPVのE6/E7遺伝子を標的とするため,正常細胞に対する影響は少ないと考えられる.HPV感染子宮頚癌細胞株HeLa(HPV18型)とSiHa(HPV16型)よりゲノムDNAを抽出,PCR法によりHPV E6/E7遺伝子領域を増幅し,E6/E7アンチセンスmRNA発現プラスミドベクターを作製した.HeLaとSiHa細胞にリポフェクション法で遺伝子導入し,G418で選択,遺伝子安定導入株をクローニングした.RT-PCR法でE6/E7アンチセンスmRNAの発現を確認したのち,内因性のHPV E6/E7 mRNA発現に対する影響を検討した.HeLaとSiHa細胞ともに,6株ずつの遺伝子安定導入株をクローニングした.E6/E7アンチセンスmRNAの発現は,HeLa6株中すべての株で,SiHa6株中5株で確認されたが,内因性のHPV E6/E7 mRNA発現には変化がみられなかった.子宮頚癌はp53依存性アポトーシスの経路が潜在的に保たれていることから,HPV E6/E7の発現抑制よる抗癌剤感受性の増強が期待される.今後更に検討を加えていきたい.

Uterine carcinoma, early stage disease, intraepithelial carcinoma, most of them are HPV HPV E6/E7 アンチセンス缝子 introduces を行い, internal cause of sacrifice のE6/E7 缝子発appears Inhibition test. HPV E6/E7 is the target of the target, and the normal cells are the target. Infection by HPV into the uterine carcinoma cell line HeLa (HPV18 type) and SiHa (HPV16 type) DNA extraction, PCR method HPV E6/E7 legacy subfield is increased, and E6/E7 is modified by mRNA.ミドベクターをManufactured by HeLa and SiHa cells Sub-import, G418 selection, remaining sub-stable import Co., Ltd. をクローニングした.RT-PC R method is used to confirm E6/E7 mRNA, endogenous HPV E6/E7 The expression of mRNA is affected by the presence of HeLa cells and SiHa cells. 6/E7 アンチセンスmRNAの発出は, HeLa6 strains among the strains, 5 strains out of the SiHa6 strains confirmed, endogenous HPV E6/E7 The expression of mRNA is the same as the current one. Uterine cancer is dependent on p53 and the potential is the same, HPV. E6/E7 has been shown to inhibit anti-cancer sensitivity and is expected to be enhanced. It will be added in the future.