分子生物学的手法を用いた内リンパ嚢におけるイオンチャンネルの同定

使用分子生物学技术识别内淋巴囊中的离子通道

• 批准号: 13770964
• 负责人: 後藤 理恵子
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kagawa Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770964/
• 关键词: endolymphatic sac; amilorde-sensitive epithelial Na channel; rat; PCR; in situ hybridization; Na-H exchanger; subtype; In situ hybridization

われわれの研究グループの最近の研究から、内リンパ嚢におけるナトリウム輸送が内リンパの恒常性維持に重要であることが明らかになりつつある。前年度の研究にて内リンパ嚢組織にNa-H exchanger(NHE)の発現がみられた。PCR法にてNHE1,NHE2,NHE3の発現が認められたが、in situ hybridization法では上皮細胞にNHE2のみの発現がみられた。両手法で発現が認められたNHE2は内リンパ嚢におけるナトリウム輸送にある役割を担っているものと考えられる。今年度はナトリウム輸送に重要な役割を持つアミロライド感受性上皮性ナトリウムチャンネルについて、PCR、in situ hybridizationを用いて、その同定を行った。実験動物はラットを用いた。PCR primerはラットアミロライド感受性上皮性ナトリウムチャンネルαサブユニットの公表されているcDNA sequenceに基づいて作成した。RT-PCRでは内リンパ嚢組織においてアミロライド感受性上皮性ナトリウムチャンネルが同定されたが、in situ hybridizationでは同定されなかった。アミロライド感受性上皮性ナトリウムチャンネルならびにNHEにおいてPCR法とin situ hybridization法による差異はその検出の感度の差によるものなのか、あるいはその他の要因が関与しているのかは今後検討の必要がある。これらの点をもっと明らかにしてから論文として発表したいと考えている。

Recent studies on the transport of internal pollutants are important for the maintenance of internal pollutants. The discovery of Na-H exchanger(NHE) in the research of the previous year was discussed. PCR was used to detect NHE1,NHE2 and NHE3, while situ hybridization was used to detect NHE2 in epithelial cells. NHE2 is the most powerful tool in the world. This year, we will continue to develop sensitive epithelials, PCR, and in situ hybridization. The animal is in the middle of it. PCR primer is prepared from cDNA sequence of sensitive epithelial gene. RT-PCR is the same as in situ hybridization. NHE PCR method and in situ hybridization method are used to detect the difference in sensitivity between the two methods. This is the first time I've ever seen a woman.