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糖尿病性血管障害におけるアポトーシスの発生メカニズムとその防御

糖尿病血管病变中细胞凋亡机制及其保护作用

基本信息

批准号：
14770608
负责人：
佐々木佳世子
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Jikei University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

培養血管内皮細胞および培養腎メサンギウム細胞を用いて,高グルコース(HG)による細胞障害における酸化的ストレスおよびアポトーシスの関与について研究を行うにあたり,まず1)HG毒性に感受性となる培養系を作製し,2)HG負荷による細胞死がアポトーシスによるものであるかを確認し,更に3)HGによる細胞障害機序を検討している。1)一般に培養血管内皮細胞の酸素毒性感受性は不安定であるが、その原因が鉄含量の変化に関係あるのではないかと考え,ヒト臍帯静脈内皮細胞(HUVEC)の継代培養細胞中の鉄含量と酸素毒性感受性との関連を調べた所,継代に伴って鉄含量は著しく減少しており,Fe/8-ヒドロキシキノリン(Fe/8HQ)を添加すると細胞の鉄含量は添加濃度に対して直線的に増加した。同様に培養腎メサンギウム細胞でも酸素毒性感受性が不安定であった。またHG毒性は酸素毒性に関与していた。鉄含量を高めた細胞では過酸化水素毒性が増強されたことから,生存率に影響を与えず過酸化水素毒性およびHG毒性に感受性となる至適鉄ロード条件を培養HUVECおよび培養ラットメサンギウム細胞において決定した。それぞれHBSSで洗浄後,0.1μM,0.5μMのFe/8HQで30分処理することで,安定なHG毒性感受性を取得することができ,この細胞系をHGで培養したものを糖尿病性血管障害モデルとして以後の解析に用いることとした。予備的に行った実験で,糖尿病モデルは正常細胞モデルに比べ細胞増殖率が低く、過酸化脂質の蓄積は大きいことが分かった。その差は高酸素ストレスをかけた場合一層顕著に有意であった。2)作製したHG毒性感受性細胞系において,HGによって引き起こされる細胞障害がアポトーシスによるものであることを,蛍光顕微鏡を用いた形態学的観察により確認した。またヘキスト染色後マイトーシスとアポトーシスの細胞カウントを行い,HGによる細胞増殖の低下はマイトーシスの低下ではなくアポトーシスの亢進によることを明らかにした。3)糖尿病性血管障害モデルとしての培養細胞系を用いて生細胞における抗酸化レベルを検討した所,グルタチオンの補酵素活性が著しく低下していたため,HGによるグルタチオンの変化を培養細胞中で検討中である。

The vascular endothelial cells were cultured in vitro. The cells were incubated with HG. The cells were acidified in the presence of cytopathic acid. The results showed that there was no significant difference between the two groups. 2) HG load, cell death, cell death and cell death. 1) in general, vascular endothelial cells are sensitive to acid toxicity, instability, cause, and so on. In general, the content of acid in endothelial cells (HUVEC) is different from that of vascular endothelial cells (EEC). Fe/8- is required to increase the temperature of the straight line by adding the content of the cell (Fe/8HQ). In the same way, the toxicity of acidins is unstable. HG toxicity, acid toxicity and acid toxicity. The results showed that the toxicity of acidified water increased significantly, the survival rate affected the toxicity of acidified water, the sensitivity of HG toxicity to the sensitivity of acidified water, the sensitivity of HG toxicity to the sensitivity of acidified water, the sensitivity of acidified water toxicity to acidified water toxicity, the sensitivity of acidified water toxicity to the sensitivity of acidified water. After washing with 0.1 μ M and 0.5 μ M Fe/8HQ, the sensitivity of diazepam to HG toxicity was analyzed. The cell line HG was cultured and the diabetic vascular disease was detected. In the case of diabetes mellitus, the normal cell cycle of diabetes mellitus is lower than the cell reproduction rate of diabetes, and the excess acidified fat is low. I don't know if I have a high concentration of acid. I don't know if I'm interested in it. 2) the cell lines of HG toxicity susceptibility were detected, and the cell barrier was induced by HG microscope. the results showed that the cell lines were sensitive to toxicity. After staining, the cells were stained, and the HG cells were stained. The cell colonies were low, the colonies were low, the colonies were low, and the cells were stained. 3) Diabetic vascular malformation, cell culture, diabetes, diabetes.

项目成果

期刊论文数量（3）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Kitamura M, Sasaki K et al.: "Regulatory pathways of retinoids in mesangial cells : Implication for oxidative stress-induced apoptosis"Nephrol Dial Transplant. (in press). (2003)

Kitamura M、Sasaki K 等人：“系膜细胞中类维生素A的调节途径：对氧化应激诱导的细胞凋亡的影响”肾移植。

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

佐々木佳世子他: "(メサンギウム細胞におけるアポトーシスの制御機構-酸化ストレスとアポトーシスを中心に-) Annual Review 腎臓 2003(伊藤克己, 浅野泰, 遠藤仁, 御手洗哲也, 東原英二(編))"(株)中外医学社. 234 (2003)

Kayoko Sasaki 等人：“（系膜细胞凋亡的控制机制 - 关注氧化应激和凋亡）年度回顾肾 2003（Katsumi Ito、Yasushi Asano、Hitoshi Endo、Tetsuya Mitarai、Eiji Higashihara（编辑））”Co. ，有限公司中外医学社 234 (2003)。