ヒト膵癌における特異抗原同定から抗体療法への展望(膵癌特異抗体の作製)

人类胰腺癌特异性抗原鉴定的抗体治疗前景（胰腺癌特异性抗体的生产）

• 批准号: 14770651
• 负责人: 池田 直也
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Nara Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770651/
• 关键词: 膵癌; 線維芽細胞; 抗体療法; モノクロール抗体; 細胞運動阻止抗体; モノクローナル抗体; Hybridoma

本研究は膵癌の腫瘍構成成分である間質に注目し、膵癌細胞と腫瘍内間質との相互作用に着目して実験を立ち上げた。他の癌腫に比べて多くの間質を有する膵癌の特徴を考え膵癌細胞が腫瘍として悪性度を獲得するためにははじめに膵癌細胞が周囲の間質に働きかけ、次のステップとして周囲の間質よりパラクライン的に必要なgrowth factor等を得て膵癌細胞にとって都合の良い環境を築いてゆくのではないかと考えた。間質のなかでも線維芽細胞に着目し、膵癌細胞自体が分泌し、線維芽細胞に影響を与える特異的分子が存在すると考え、臨床応用を目的とした膵癌に特異的で且つ機能を有するモノクローナル抗体の作製を計画した。14年度は当科にて樹立した線維芽細胞株NAFI-1の遊走能を抑制するモノクローナル抗体をスクリーニングにより二種類得た。15年度はさらに、新たに膵癌切除標本より培養を繰り返して膵癌由来線維芽細胞株PNAFI-1を樹立した。このPNAFI-1の培養上清を加えて多数のヒト膵癌株を培養したところ、9株中7株で著明に増殖能が高まることが判明した。また、逆にPNAFI-1も単独培養よりも膵癌細胞株培養上清を添加した際に増殖能並びに遊走能が高まることが判明した。さらに興味深いことに、切除胃癌より樹立した胃癌由来線維芽細胞株の培養上清を膵癌細胞株に添加しても増殖能に変化は認めなかった。これらの実験結果より、膵癌細胞と膵線維芽細胞とは膵癌という腫瘍を形成してゆくなかで互いに相乗効果を及ぼすという結果を得ることができた。また、前回に同様のモノクローナル抗体の作製方法にて血管新生を標的としたモノクローナル抗体作製においては、ヒト線維肉腫細胞株HT1080の細胞運動を著明に阻止し、且つ、血管内皮細胞モデルHUVECの運動、並びに管腔形成を著明に抑制するMAb MH8-11が得られ、このモノクローナル抗体は遺伝子クローニングによりAminopeptidase N (APN)/CD13を認識していることをつきとめた。さらに、ヒト膵癌におけるAPN/CD13発現の意義を検討したところ、血管新生の指標とした血管密度と有意に相関し、また、APN/CD13は予後不良膵癌における重要な予後規定因子の一つであることを見いだした。以上の研究結果は、 Clin Cancer Res.2003 Apr :9(4):1503-1508、Anticancer Res.2003 Mar-Apr :23(2B):1333-1341、Anticancer Res.2003 Nov-Dec :23(6C):4721-7、Oncol Rep.2004 Feb :11(2):277-84に論文発表した。

This study は の Cui cancer is swollen sores composition で あ る interstitial に attention し, Cui cancer cells within the と swollen sores interstitial と の に interaction with mesh し て be 験 を stand on ち げ た. More than his の cancer に べ て く の interstitial を have す る の Cui carcinoma, 徴 を exam え Cui cancer が swollen sores と し て 悪 degrees を acquired す る た め に は は じ め に Cui cancer が weeks 囲 の interstitial に 働 き か け, の ス テ ッ プ と し て weeks 囲 の interstitial よ り パ ラ ク ラ イ ン に necessary な growth Factor such as を have て Cui cancer に と っ て are built い い の good environmental を て ゆ く の で は な い か と exam え た. Interstitial の な か で も line d bud cells に し, Cui cancer cells and autologous し が secretion, line d に influence を bud cells and え が る specific molecules exist す る と え test purpose, clinical 応 を と し た に specific で Cui carcinoma and つ function を has す る モ ノ ク ロ ー ナ ル antibody の cropping を plan し た. 14 year は when に て set し た line d bud cell lines NAFI - 1 の wander can suppress す を る モ ノ ク ロ ー ナ ル antibody を ス ク リ ー ニ ン グ に よ た り two kinds. 15 year は さ ら に, new た に Cui carcinoma resection specimen よ り cultivate を Qiao り return し て origin line d bud Cui carcinoma cell lines を PNAFI - 1 set し た. こ の PNAFI - 1 の culture supernatant を plus え て most の ヒ ト Cui carcinoma strain を cultivate し た と こ ろ, 9 strains of 7 strains で zhao Ming に rights can yield high が ま る こ と が.at し た. ま た, reverse に PNAFI - 1 も 単 alone cultivate よ り も Cui cancer cells culture supernatant を add し た interstate に rights can yield and び に can wander が high ま る こ と が.at し た. さ ら に tumblers deep い こ と に and removal of the stomach よ り set し た stomach origin line d bud cell lines の culture supernatant を に Cui cancer cells to add し て も rights can yield に variations change は recognize め な か っ た. こ れ ら の be 験 results よ り, Cui cancer と Cui line d bud cells と は Cui carcinoma と い う swollen sores を form し て ゆ く な か で mutual い に phase 乗 unseen fruit を and ぼ す と い う results る を こ と が で き た. に back by ま た, with others in の モ ノ ク ロ ー ナ ル antibody の cropping method に て angiogenesis を mark と し た モ ノ ク ロ ー ナ ル antibodies for making に お い て は, ヒ ト line d meat swollen cell lines HT1080 の cell movement を zhao Ming に stop し, and つ, vascular endothelial cells モ デ ル HUVEC の movement, and び に lumen formed を zhao Ming に inhibit す る MAb MH8-11 が have ら れ, こ の モ ノ ク ロ ー ナ は but 伝 son ク ル antibody ロ ー ニ ン グ に よ り Aminopeptidase N (APN)/CD13 を know し て い る こ と を つ き と め た. さ ら に, ヒ ト Cui carcinoma に お け る APN/CD13 発 の meaning を now beg し 検 た と こ ろ, angiogenesis の と し た vascular density と intentionally に phase masato し, ま た, APN/CD13 は to bad Cui carcinoma after に お け る important after な to stipulation factor の つ で あ る こ と を see い だ し た. The above youdaoplaceholder3 research results, Clin Cancer Res.2003 Apr :9(4):1503-1508, Anticancer Res.2003 Mar-Apr :23(2B):1333-1341, Anticancer Res.2003 Nov-Dec :23(6C):4721-7, Oncol Rep.2004 Feb :11(2):277-84に publication of papers た.

项目成果

Fukumoto A et al.: "Prognostic significance of localized p27Kipl and potential role of Jabl/CSN5 in pancreatic cancer."Oncology Report. 11(2). 277-284 (2004)

Fukumoto A 等人：“局部 p27Kipl 的预后意义和 Jabl/CSN5 在胰腺癌中的潜在作用。”肿瘤学报告。

Ikeda N et al.: "Clinical significance of aminopeptidase N/CD13 expression in human pancreatic carcinoma."Clinical Cancer Research. 9(4). 1503-1508 (2003)

Ikeda N 等人：“氨肽酶 N/CD13 表达在人类胰腺癌中的临床意义。”临床癌症研究。

Matsumoto H et al.: "Prognostic significance of death-associated protein-kinase expression in hepatocellular carcinomas."Anticancer Research. 23(2B). 1333-1341 (2003)

Matsumoto H 等人：“肝细胞癌中死亡相关蛋白激酶表达的预后意义。”抗癌研究。

Naoya Ikeda: "Clinical Significance of Aminopeptidase N/CD13 Expression in Human Pancreatic Carcinoma"Clinical Cancer Research. 9・4(in press). (2003)

Naoya Ikeda：“氨基肽酶 N/CD13 表达在人类胰腺癌中的临床意义”临床癌症研究 9·4（出版中）。