クロマチン構造の変化に由来するCYPの性特異的発現調節

来自染色质结构变化的 CYP 表达的性别特异性调节

• 批准号: 14771271
• 负责人: 高橋 芳樹
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: National Institute of Health Sciences (2003)Hokkaido University (2002)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14771271/
• 关键词: CYP2C12; クロマチン; 性差; STAT5; プロモータ

ラットの薬物代謝能には顕著な性差が存在し,その原因の一つとして雌雄で各々特異的に発現するCYP分子種の存在が考えられている.この性特異的なCYP分子種の発現は,成獣ラットにおける成長ホルモン(GH)分泌の性差と密接に関係している.そこで本研究では,CYP2C12遺伝子の雌性特異的な発現制御機構を解明することを目的とした.我々が開発したダイレクトDNAインジェクション法では,CYP2C12遺伝子の性特異的な発現を再現できなかったことから,クロマチン構造レベルで遺伝子が不活性化されている可能性を考えた.この可能性を検証するため,雌雄ラットの肝臓から調製した核を用いてDNase I hypersensitive assayを行い,CYP2C12遺伝子のクロマチン構造が雌雄で異なり,雄性ラットではCYP2C12遺伝子のエンハンサーおよびプロモーター領域が凝縮した構造であることを明らかにした.したがって雄性ラットでは,これらの領域に結合する転写因子のDNAへの接近が妨げられ,CYP2C12遺伝子を活性化できない可能性が推測された.さらに雄性特異的なhypersensitive site (HSm)も存在した.雄性ラットに特異的なHSmについて詳細に解析し,HSmを含む領域が転写抑制領域として働くことを見いだした.この領域中には,肝に豊富に存在する転写因子であるC/EBPの推定結合配列が3箇所(C/EBP site 1,site 2およびsite 3)存在した.この領域に結合する転写因子について解析し,実際にC/EBPαおよびC/EBPβが結合することを明らかにした.このことより,CYP2C12遺伝子の転写抑制には,C/EBPαとβが寄与していることが示唆された.

ラ ッ ト の 薬 material metabolism can に は 顕 exist sex differences な が し, そ の reason の つ と し て male and female で 々 each specific に 発 now す る CYP molecular の existence が exam え ら れ て い る. こ の sex specific な molecular of CYP の 発 は, into 獣 ラ ッ ト に お け る growth ホ ル モ ン poor (GH) secretion の と contact に masato is し て い る. そ こ で in this research The research on で た, the female specific な occurrence control mechanism of CYP2C12 伝 offspring を, the explanation of する する とを とを purpose of と た た. I 々 が open 発 し た ダ イ レ ク ト DNA イ ン ジ ェ ク シ ョ ン method で は, CYP2C12 heritage 伝 son の sex specific な 発 now を reappearance で き な か っ た こ と か ら, ク ロ マ チ ン tectonic レ ベ ル で posthumous son 伝 が not activeness さ れ て い る possibility を exam え た. こ の possibility を 検 card す る た め, male and female ラ ッ ト の is crucial liver か ら modulation し た nuclear を Use てDNase I hypersensitive Assay を い, CYP2C12 posthumous son 伝 の ク ロ マ チ ン tectonic が male and female で different な り, male ラ ッ ト で は CYP2C12 posthumous son 伝 の エ ン ハ ン サ ー お よ び プ ロ モ ー タ ー field が condensation し た tectonic で あ る こ と を Ming ら か に し た. し た が っ て male ラ ッ ト で は, こ れ ら の fields に す る write factor の D planning NA へ の near が hinder げ ら れ, CYP2C12 posthumous son 伝 を activeness で き な い possibility が speculation さ れ た. さ ら に male specific な hypersensitive site (HSm) も し た. Male ラ ッ ト に specific な HSm に つ い て detailed analytical し に, HSm を containing が む field planning, inhibit field と し て 働 く こ と を see い だ し た. こ の field に は, liver に aboundant に exist す る planning write factor で あ る C/EBP の presumption by combining with column が 3 (C/EBP site 1 and site 2 お よ び site 3) exist し た. こ の fields に す る planning write factor に つ い て parsing し, be interstate に C/EBP alpha お よ び C/EBP beta が combining す る こ と を Ming ら か に し た. こ の こ と よ り, CYP2C12 heritage 伝 son の planning write inhibit に は, C/EBP alpha と beta が send し て い る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

高橋 芳樹: "薬物代謝の誘導と分子機構"YAKUGAKU ZASSHI. 123. 17-20 (2003)

高桥芳树：“药物代谢的诱导和分子机制”YAKUGAKU ZASSHI。123. 17-20 (2003)

Nukaya Manabu: "Aryl hydrocarbon receptor-mediated suppression of GH receptor and Janus kinase 2 expression in mice"FEBS Letter. (In press). (2004)

Nukaya Manabu：“芳基碳氢化合物受体介导的小鼠 GH 受体和 Janus 激酶 2 表达抑制”FEBS Letter。