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トランスジェニックマウスを用いたマンナン結合タンパク質の機能解析

使用转基因小鼠进行甘露聚糖结合蛋白的功能分析

基本信息

批准号：
14780490
负责人：
上村和秀
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14780490/
关键词：
動物レクチン糖鎖トランスジェニックマウス

项目摘要

マンナン結合タンパク質(MBP)はマンノース、N-アセチルグルコサミンおよびフコースに特異的な動物レクチンで、これらの糖鎖を末端にもつ糖鎖リガンドとカルシウム依存的に結合する。脳にはMBPの糖鎖リガンドが広く発現することが分かっていたが、脳におけるMBPの生理的役割はほとんど分かっていない。そこで、本年度はMBPを脳に過剰発現させたトランスジェニックマウスの作成を進めた。まず、ヒトMBPcDNAの翻訳領域をpGFGHに挿入し、脳特異的発現のための発現ベクターを作成した。pGFGHはThe Scripps Research InstituteのCampbell博士より恵与された脳特異的発現用コンストラクトで、マウスGFAP(glial fiber acidic protein)のプロモーター領域とヒト成長ホルモンのpolyA付加シグナル領域を含む。作成したトランスジェニックベクターをC57BL6マウスの受精卵に注入して、出生したマウスをサザンブロツトおよびPCRによりスクリーニングした。その結果、ヒトMBP遺伝子が導入されたマウス(Founder)を一匹得た。このFounderマウスとC57BL6の交配により作成したF1マウスは、脳においてヒトMBPのmRNA発現することが確認された。今後、ウェスタンブロツトによるタンパク質レベルでの発現の確認および表現型の解析を進める予定である。

The binding protein (MBP) is an animal specific protein that binds to the N-terminal, N-terminal and N-terminal glycan chains. The MBP is a sugar chain that can be found in a variety of physiological processes. This year, the MBP has been developed. The expression of MBPcDNA in pGFGH was detected by PCR, and the expression of MBPcDNA in pGFGH was detected by PCR. pGFGH is part of The Scripps Research Institute's Campbell Institute, which specializes in the development of glial fiber acidic protein (GFAP). C57BL6 is the first time that the sperm has been injected into the sperm, and the sperm has been injected into the sperm. The result of the test is that the MBP gene is introduced into the system. The Founder of the C57BL6 was identified by the expression of MBP mRNA. In the future, the identification of the occurrence of the disease and the analysis of the phenotype will be further determined.