ユビキチン付加部位変異p53の癌遺伝子治療への応用に関する基礎的研究

泛素添加位点突变体p53在癌症基因治疗中应用的基础研究

• 批准号: 14770100
• 负责人: 中村 誠一
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770100/
• 关键词: p53; ユビキチン; MDM2; 細胞周期制御; アポトーシス; 細胞周期調節

癌抑制遺伝子p53蛋白質は,MDM2を介する分解を受けるが,その際,p53にユビキチンが付加され,最終的にプロテアソームで分解される.ユビキチン付加部位の候補として,C末端領域のリシン残基が考えられる.370,372,373,381,380のリシン残基をアラニンに置換した変異p53を作製して,そのユビキチン化の程度,細胞に与える影響を解析した.これらのリシン残基を4つ以上変異したp53をMDM2発現プラスミドとともに,非小細胞肺癌細胞株(H1299)で発現させると,野生型p53とMDM2の共発現で認められるような,p53蛋白レベルの低下,ユビキチン付加が認められなかったことより,p53C末端領域のリシン残基が重要であることが示唆された.しかし,それぞれのリシン残基単独の突然変異では,MDM2との共発現でp53蛋白レベルの低下,ユビキチン付加が認められたことより,これらのリシン残基の中で,ユビキチン付加部位として単独のリシン残基を想定するよりも,複数のリシン残基が同時にユビキチン付加を受けることが,p53分解に重要であると考えられた.このリシン残基変異p53の消化器癌に対しての治療効果を検討するため,大腸癌細胞株(Colo201,LoVo,WiDr)を用いて,リシン残基p53発現プラスミドをトランスフェクションし,コロニー形成能に与える影響を検討した.しかしながら,十分な発現を得ることが困難であり,効率の良い遺伝子導入法が必要となった.そのため,リシン残基p53発現アデノウイルスを作製した.今後は,このアデノウイルスを用いて,消化器癌細胞への効果を検討する予定である.

Cancer suppressant p53 protein, MDM2 induces decomposition of p53 protein, p53, p53, The C-terminal domain is sensitive to the residue. 370372373381380. The residue is sensitive. The p53 gene is sensitive, the cell is sensitive, and the cell is sensitive to the residue. The wild type p53 MDM2 cell line (H1299), wild type p53 cell line (H1299), non-small cell lung cancer cell line (H1299). The p53 protein was found to be low in MDM2, and the positive rate of p53 protein was significantly lower than that of the control group. It was found that the p53 protein level was low, the p53 protein level was low, the p53 protein was detected, the p53 protein was not detected, the p53 protein was found to be low, the p53 protein was detected, the p53 protein was The decomposition of p53 is very important. The cancer of digestive organ was treated with p53 residue. The results showed that the cancer cell line (Colo201,LoVo,WiDr) of large cancer cell line was used. The residual p53 gene was detected. I am sorry to hear that I have found that I am in trouble and that it is necessary for me to enter the law. This is the first time that the p53 residue has been detected. In the future, please tell me how to use it, and the cancer of the digestive tract will be affected.