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チフス菌分泌タンパクとマクロファージ内増殖機構に関する研究

伤寒杆菌分泌蛋白及巨噬细胞增殖机制研究

基本信息

批准号：
14770126
负责人：
廣瀬健二
金额：
$ 2.11万
依托单位：
National Institute of Infectious Diseases
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770126/
关键词：
サルモネラマクロファージ細胞内増殖チフス菌 Two-Hybrid System 分泌蛋白

项目摘要

現在までにサルモネラの腸管上皮細胞の侵入にはType3secretion systemという蛋白を分泌する細菌の機能が非常に重要であることが明らかになっている。Type3secretion systemは多くの病原細菌に共通の蛋白分泌装置と考えられ、その働きは病原性を発揮するのに必要な蛋白の分泌と考えられている。そして、チフス菌にも同じType3secretion systemがあることも明らかになった。サルモネラのType3 secretion systemからはSipA,SipB,SipC,SipD,SseA,SseB,SseC,SseDなどの腸管上皮細胞侵入やマクロファージ中での生存・増殖に関与した蛋白が分泌される。さらに、これら分泌された蛋白は宿主の細胞に注入されることが証明されている。私たちの研究では、これらの分泌性蛋白に注目し、SseA,SseB,SseC,SseDが宿主の細胞内に入ってから細胞内でどのような働きをするのかを明らかにすることを目的としている。はじめに、酵母を用いたTwo-Hybrid Systemを利用してSseD分泌蛋白が宿主の細胞内に入ってからどのような蛋白と相互作用があるかを探した。スクリーニングを行った結果,約60個の相互作用がありそうなコロニーを得ることができた。この中でマクロファージ細胞内に存在しそうな蛋白である、チロシンリン酸化酵素、イムノグロブリン結合蛋白を選び、細胞内でSseD蛋白と実際に結合しているかを免疫沈降法で確認した。このうち,チロシンリン酸化酵素,イムノグロブリン結合蛋白は実際にはSseD蛋白との結合はないものと考えられた。約60個の相互作用がありそうなコロニーのうち可能性の高いものからさらに免疫沈降法で確認を続けたが、実際にSseDと結合するものは見つかったが、結合自体が特異的な結合ではなかった。また、結合してもその後に続く反応が見られないものばかりであった。これらのことより、SseDと結合する蛋白で有意義なものは発見することができなかった。また、SseDがマクロファージ内の増殖に関与するというデーターも得られなかった。

Invasion of intestinal epithelial cells Type 3secretion now It is very important for the function of bacteria to secrete proteins in the system. Type3secretion system is a common protein secretion device for pathogenic bacteria and a common protein secretion device for pathogenic bacteria.そして、チフス草にも同じType3secretion systemがあることも明らかになった.サルモネラのType3 secretion systemからはSipA,SipB,SipC,SipD,SseA,SseB,SseC, SseD is responsible for the survival, proliferation and secretion of intestinal epithelial cells in intestinal epithelial cells. It is proven that the protein secreted by さらに and これら is injected into the host cells by されることが. Private research on secreted proteins, SseA, SseB, SseC, SseD The main cell is the main cell, the cell is the cell, and the cell is the cell.はじめに、Yeast uses いたTwo-Hybrid System をUtilizes してSseD secretion protein to enter the host cell and interact with てからどのようなprotein to explore した. As a result of the スクリーニングを行った, about 60 interactive がありそうなコロニーをgets ることができた. There are しそうなprotein である, チロシンリン acidifying enzyme, and イムノグロ in the この中でマクロファージ cells. The binding of RIN-binding protein and intracellular SseD protein was confirmed by immunoprecipitation method.このうち, チロシンリン acidifying enzyme, イムノグロブリン combined egg白は実记にはSseDproteinとの合はないものと卡えられた. Approximately 60 possible interactions were confirmed by immunosedimentation method.続けたが, 実记にSseDと合するものは见つかったが, combine self-specific な合ではなかった.また、合してもその后に続く応が见られないものばかりであった.これらのことより、SseDとbinding するproteinでmeaningなものは発见することができなかった.また, SseDがマクロファージ内の嗗综合に关 and するというデーターも得られなかった.