破傷風毒素とBc1-2の融合蛋白を用いた運動神経細胞死抑制

使用破伤风毒素和 Bc1-2 融合蛋白抑制运动神经元细胞死亡

• 批准号: 14770291
• 负责人: 渡邉 保裕
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770291/
• 关键词: 破傷風毒素; Bcl-2; 筋萎縮性側索硬化症; apoptosis

破傷風毒素(TeNT)は,創傷部位から侵入して逆行性軸索輸送により中枢神経に達し,脊髄・脳幹の抑制性神経伝達を阻害する.TeNTは蛋白毒素でN末端側から,毒素ドメイン,膜輸送ドメイン,レセプター結合ドメイン(TTC)に分けられる.TTCドメインは、TeNTと同様に脊髄神経細胞に到達することが示されている.一方、Bcl-2はヒト濾胞性リンパ腫に関わる癌遺伝子として発見され,種々の刺激で誘導されるアポトーシスを抑制することが広く知られている.本研究で我々はTTCとBcl-2の融合蛋白を作成することによりBcl-2を運動神経に輸送することを試みた.融合蛋白をCos7細胞とIn vitro transcription/translation法による蛋白発現系により検討したが,宿主細胞の違い等により、発現は低レベルにとどまった.続いて大腸菌での蛋白発現系を確立し,融合蛋白の精製をおこなった.精製蛋白は,培養神経細胞への接着能,取り込みなどにおいてTTCと同様の作用を示すことが確認された.さらに我々は融合蛋白は培養神経細胞の血清奪取による細胞死を一部抑制することを示した。以上の検討により、TTCとBcl-2の融合蛋白は、神経細胞死を抑制する治療として有効である可能性が示唆され、運動神経細胞を選択的に障害する筋萎縮性側索硬化症などの治療への応用が期待される今後、動物モデルでの融合蛋白の効果の検討や、本融合蛋白を効率的に運動神経細胞へ到達することを目的としたin vivoでの発現系の検討をおこなうよう準備を進めている。

Break the toxin (TeNT), damage the site, invade the retrograde cable, send the central nervous system, the spinal cord, the inhibitory agent, the inhibitor, the TeNT proteotoxin, the toxin, the toxin, the membrane. In combination with TTC, and TeNT have the same information to show that they are safe. On the one hand, the Bcl-2 cell cycle was not found in the child of the cancer cell, and the stimulation of a variety of drugs led to the inhibition of the cancer. In this study, we designed the fusion protein of BCL-2 protein in TTC and made it into Bcl-2 fusion protein which can be used as an antiviral agent. The fusion protein, Cos7, cell, In vitro transcription/translation, protein, protein and protein. The protein was confirmed, and the fusion protein was purified. After that, you can make sure that your TTC is the same as that of your mother. The serum of the fusion protein was extracted from the serum of the cell, which inhibited the death of the cell. The above drugs, TTC Bcl-2 fusion protein, mycophenolate moiety, anti-tumor, anti-tumor, anti-inflammatory, anti-inflammatory, anti- The expression rate of this fusion protein is highly sensitive to the activity of the fusion protein. The purpose of this fusion protein is to prepare for further development of the fusion protein in the presence of in vivo.