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培養細胞の生理活性物質生産性の機能制御

培养细胞中生理活性物质生产力的功能控制

基本信息

批准号：
14780649
负责人：
原万里子
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Seikei University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

様々な高分子膜上に生理活性物質であるインスリンを生産するMIN6細胞(ラット由来β細胞)を培養して、細胞の増殖とグルコース濃度に対応したインスリンの生産性から細胞の足場となる基板の細胞への影響を検討した.さらに、どのような細胞培養用膜が細胞増殖に適しているのか、MIN6細胞の成長並びにグルコース濃度に対応したインスリンの生産性と高分子膜の特性との関係を解明することが本研究の最終目的である。細胞培養膜基板として、フィブロネクチンの細胞接着活性ドメイン配列Arg-Gly-Asp (RGD)を含む絹フィブロイン模倣ペプチド膜基板を調製した。様々なRGD含有絹フィブロイン模倣ペプチドを、ヘキサフルオロアセトン(HFA)の溶媒でそれぞれcast法により製膜して、細胞培養膜基板として用いた。これらの基板上にMIN6細胞を培養して、細胞の増殖と形態観察を行なった。また、ELISA法を用いて高グルコース状態並びに低グルコース状態においてインスリン濃度を測定した。培地中に存在する異なるグルコース濃度(3.3mM並びに25.0mM)に対するMIN6細胞からのインスリン生産性と細胞培養基板である様々なRGD含有絹フィブロイン模倣ペプチド膜基板との関係を検討した。培地中のグルコース濃度が低グルコース濃度である3.3mMよりも高グルコース濃度である25.0mMと高い方が、MIN6細胞からのインスリンの生産性はin vivoの状態と同様に高くなることが観察された。また、絹フィブロイン模倣ペプチド中にRGD部位が存在する基板上での方が、インスリンのグルコース濃度に対応した生産応答性は優れていることが観察された。

Bioactive substances are produced and cultured on であるインスリンを on 様々なpolymer membrane and MIN6 cells (ラット-derived beta cells) , cell proliferation and concentration of cells and the influence of cells on substrate and productivity of cells.した.さらに, どのような cell culture membrane, cell proliferation and compatibility, MIN6 cell growth and compatibility The relationship between the concentration and productivity of the polymer film and the properties of the polymer film are explained and the final purpose of this study is explained. Cell Culture Membrane Substrate として, フィブロネクチンの Cell Adhesion Activity ドメイン Arg-Gly-Asp (RGD) contains the modulation of the silk fiber film substrate imitating the film.様々なRGD contains silk フィブロイン imitation ペプチドを, ヘキサフルオロアセトン (HF A) The solvent is used for film production using the cast method, and the cell culture membrane substrate is used. The MIN6 cells were cultured on the substrate and the cells were multiplied and the morphology was observed. The ELISA method is used to measure the concentration of high-concentration and high-concentration low-concentration state. The presence of different concentrations in the soil (3.3mM and 25.0mM) is used in MIN6 cells. The スリン productive cell culture plate である様々なRGD contains silk フィブロイン imitation ペプチド membrane substrate とのrelative を検した. Peidi medium low concentration low concentration 3.3mM high concentration Concentration is 25.0mM, high density, MIN6 cell productivity The status of vivo is the same as the high one.また、绢フィブロイン imitates the RGD part in the ペプチド and the RGD part exists on the substrate でのsquareが、インスリンのグルコースconcentrationに対応したproduction 応综合性は优れていることが観看された.