様々な高分子基板上に培養した動物細胞による抗原並びにインターフェロンの高生産法

使用在各种聚合物基质上培养的动物细胞高产抗原和干扰素的方法

• 批准号: 11780631
• 负责人: 原 万里子
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Seikei University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11780631/
• 关键词: NB1RGB細胞; インターフェロンβ; ラングミュアーブロジェット法; キャスト法; 高分子基板; α-ヘリックス含量; CEA(癌胎児性抗原); ラングミューアー・ブロジェット; インターフェロン

NB1RGB細胞(ヒト新生児皮膚繊維芽細胞)を用いていかなる培養環境(培養用高分子基板並びに化学(毒性)物質を添加した培地)がインターフェロンβの生産性を増大させるかを検討した。様々な高分子基板上に培養したNB1RGB細胞によるインターフェロンβの生産性を検討するためにポリアミノ酸、コラーゲン、シルク、バイオポール、テコフレックス等を用いて、キャスト法並びにラングミュアーブロジェット(LB)法により細胞培養用高分子基板を調製した。NB1RGB細胞を24穴内の各高分子基板上に、CO_2インキュベーター内で培養し、倒立型顕微鏡にて細胞数を計測した。対数増殖期にあるNB1RGB細胞に対してインターフェロンβ誘導操作を行ない、24時間培養後に基板ごとにインターフェロンβをELISA法により測定した。これより、単位細胞数あたりのインターフェロンβ産生量の最も高い高分子基板を判定し、インターフェロンβ産生量と細胞増殖性との相関性を検討した。次に、各高分子基板上に吸着した血清タンパク質のα-ヘリックス含量とインターフェロンβ生産量との相関性を検討した。円偏光二色性(CD)分散計により高分子基板上に吸着した血清タンパク質のCDスペクトルを測定し、α-ヘリックス含量を算出した。キャスト基板上よりLB基板上で培養したほうが、高いインターフェロンβ産生量を示した。NB1RGB細胞を用いたインターフェロンβ産生性において、基板に吸着した血清タンパク質が、変性せずにほぼ生理的条件でとっている固有のα-ヘリックス含量を保持している基板上において、高いインターフェロンβ産生量を示した。

NB1RGB cells (new born skin cells) were cultured in a いていかなる culture environment (polymer substrate for culture andびにChemical (toxic) substances をAdd した地) がインターフェロンβの Productivity を Increase large させるかを検した.によるインターフェロ Cultured NB1RGB cells on the polymer substrateンβのproductive を検褜するためにポリアミノAcid, コラーゲン, シルク, バイオポール, テコフレックス, etc. are used by いて, キャスト法与びにラングミュThe アーブロジェット (LB) method is used to prepare polymer substrates for cell culture. NB1RGB cells were cultured in 24 wells on each polymer substrate, CO_2 cells were cultured, and the number of cells was measured using an inverted microscope. The operation of NB1RGB cells in the proliferative stage and the operation of β-induced β-activation , after 24 hours of culture, the substrate was measured using the ELISA method. The highest number of cells per unit and the highest amount of beta produced are polymer bases The correlation between plate determination and インターフェロンβ production and cell proliferation was determined. For each polymer substrate, there is a correlation between the alpha-condensation content of the serum adsorbed on each polymer substrate and the production volume of the adsorbed serum. The polarizing dichroism (CD) dispersion meter was used to measure the content of adsorbed serum dichroism on the polymer substrate and calculate the content of α-dichromatic dichroism. The amount of β-β produced by culturing on the キャスト substrate and the よりLB substrate is shown in the figure. NB1RGB cell いたインターフェロンβ production において, substrate にabsorption したserum タンパク性が, 変性 せずにほぼphysiology The condition is that the intrinsic alpha-condensation content is maintained on the substrate and the production amount of high-density β is high.