様々な高分子基板上に培養した動物細胞による抗原並びにインターフェロンの高生産法

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NB1RGB細胞(ヒト新生児皮膚繊維芽細胞)を用いていかなる培養環境(培養用高分子基板並びに化学(毒性)物質を添加した培地)がインターフェロンβの生産性を増大させるかを検討した。様々な高分子基板上に培養したNB1RGB細胞によるインターフェロンβの生産性を検討するためにポリアミノ酸、コラーゲン、シルク、バイオポール、テコフレックス等を用いて、キャスト法並びにラングミュアーブロジェット(LB)法により細胞培養用高分子基板を調製した。NB1RGB細胞を24穴内の各高分子基板上に、CO_2インキュベーター内で培養し、倒立型顕微鏡にて細胞数を計測した。対数増殖期にあるNB1RGB細胞に対してインターフェロンβ誘導操作を行ない、24時間培養後に基板ごとにインターフェロンβをELISA法により測定した。これより、単位細胞数あたりのインターフェロンβ産生量の最も高い高分子基板を判定し、インターフェロンβ産生量と細胞増殖性との相関性を検討した。次に、各高分子基板上に吸着した血清タンパク質のα-ヘリックス含量とインターフェロンβ生産量との相関性を検討した。円偏光二色性(CD)分散計により高分子基板上に吸着した血清タンパク質のCDスペクトルを測定し、α-ヘリックス含量を算出した。キャスト基板上よりLB基板上で培養したほうが、高いインターフェロンβ産生量を示した。NB1RGB細胞を用いたインターフェロンβ産生性において、基板に吸着した血清タンパク質が、変性せずにほぼ生理的条件でとっている固有のα-ヘリックス含量を保持している基板上において、高いインターフェロンβ産生量を示した。