家畜におけるレプチンの機能と分泌調節機構の解明

阐明牲畜瘦素的功能和分泌调节机制

• 批准号: 03F00123
• 负责人: 斉藤 昌之
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03F00123/
• 关键词: レプチン; 脂肪細胞; ウシ

脂肪細胞はエネルギーを貯蔵・供給しているばかりでなく、様々な生理活性因子を合成・分泌しており、これら脂肪細胞由来ペプチドはアディポサイトカインと呼ばれている。レプチンは代表的なアディポサイトカインであり、摂食抑制、エネルギー消費亢進、性腺機能亢進、免疫増強、等の多彩な作用を示すことが知られている。しかし、これらの大部分は、マウスやヒトでの知見であり、独特の脂肪・エネルギー代謝機構を持つ反すう動物での知見は極めて少ない。本研究では、反すう家畜でのレプチンについて、ウシを対象として合成分泌の調節機構を明らかにすることを目的として細胞レベルでの検討を行い、以下の成果を得た。1)ホルスタイン牛の脂肪組織をコラゲナーゼ処理し、遠心分離操作を経て、前駆脂肪細胞画分を得た。これをDMEM培地で培養し、コンフルエントに達した後、培地にインスリン、デキサメタゾン、IBMXを添加して脂肪分化を促し、経日的に細胞を観察した。2)分化刺激後、細胞内に次第に中性脂肪滴が蓄積し、約10日後にはほぼ完全に脂肪細胞様の構造に変化した。3)脂肪細胞に特異的な遺伝子(aP2,GLUT4,PPARgなど)のmRNA発現をRT-PCR法で調べたところ、分化刺激後4-8日で数倍に増加した。4)レプチンmRNAも、やはり分化刺激後4-8日で数倍に増加した。これらの結果から、ウシ脂肪細胞の初代培養法を確立出来たと判断した。特に、分化を促すインスリンはマウス脂肪細胞の場合よりもはるかに高濃度が必要であり、反すう動物でのインスリン抵抗性に符合していた。現在、この培養脂肪細胞を用いて、レプチン合成に対する各種ホルモンや低級脂肪酸の影響などを検討中である。

Adipose cells produce, store, and secrete physiologically active factors. The effects of "food suppression,""consumption hyperactivity,""gonadal hyperactivity,""immune enhancement," etc. are shown in the following ways: Most of the animals have a unique fat metabolism mechanism, and most of them have a unique fat metabolism mechanism. This study was conducted to investigate the regulatory mechanisms of synthesis and secretion in livestock and poultry, and the following results were obtained. 1) The subcutaneous fat of cattle is processed by centrifugation, and the fat cells are separated by centrifugation. In addition to DMEM, the growth of cells in culture, and growth of cells in culture 2) After differentiation stimulation, neutral fat droplets accumulated in the cells, and after about 10 days, the structure of adipocytes changed completely. 3)mRNA expression of adipocyte-specific genes (aP2, GLUT4,PPARg) was modulated by RT-PCR and increased several times after 4-8 days of differentiation stimulation. 4) mRNA expression increased several times 4-8 days after stimulation. The results of this study were as follows: 1. In particular, differentiation is promoted by high concentrations of adipocytes, and resistance to adipocytes is consistent with high concentrations. Now, the effects of low fatty acids on the synthesis and utilization of cultured adipocytes are discussed.

项目成果

Shibata, H., Sasaki H., et al.: "Feline Leptin : Immunogenic and Biological Activities of the Recombinant Protein, and Its Measurement by ELISA"J.Vet.Med. 65. 1207-1211 (2003)

Shibata, H., Sasaki H., et al.：“猫瘦素：重组蛋白的免疫原性和生物活性，及其通过 ELISA 的测量”J.Vet.Med。