単純ヘルペスウイルスUL56遺伝子産物の機能解析

单纯疱疹病毒UL56基因产物的功能分析

• 批准号: 03J00847
• 负责人: 腰塚 哲朗
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J00847/
• 关键词: HSV; 小胞輸送; envelopment; vesicle transport

単純ヘルペスウイルス(HSV)のコードするUL56遺伝子産物は、C末端アンカー型膜タンパク質である。UL56はゴルジ体、Early endosomeなどの脂質膜構造に局在し、その一部はラフト上に存在していることを明らかにしてきた。本研究はUL56タンパク質と相互作用するパートナーを同定し、UL56の機能を予測・解析することを目的とした。本研究により、宿主側因子のKIF1A、ウイルス側因子のUL11がUL56のパートナーであることが明らかとなった。KIF1Aは神経細胞特異的に発現しているKinesinの一つであり、C末端部分に脂質と相互作用するPH domainを持ち、presynaptic vesicleの輸送に関わっていることが報告されている。Yeast two-hybrid法、GST-pulldown法、蛍光抗体法を用い、KIF1AがUL56と相互作用していることを示した。UL56は神経細胞内においてKIF1Aのレセプターとして細胞質小胞上に存在し、ウイルス糖タンパク質などの軸索内輸送に関わっている可能性が示唆された。この結果は2005年5月号のJ.Gen.Virol.に掲載予定である。UL11遺伝子はヘルペスウイルスに保存されている遺伝子である。UL11はN末端部分においてミリスチン酸化、パルミチン酸化を受ける膜タンパク質である。HSVにおいてUL11はHSVのエンベロープ獲得に重要であり、この欠損は粒子形成を著しく減弱することが報告されている。GST-pulldown法、免疫沈降法、蛍光抗体法を用い、UL56とUL11がタンパク質複合体を形成していることを明らかにした。この複合体形成にはUL11のN末端部分が必要であり、特に脂質付加が重要であることが分かった。UL56の欠損はHSVの増殖に大きな影響を与えないが、以上の結果からUL56がHSVの粒子形成、特にエンベロープ獲得に重要な働きを担っている可能性が示唆された。この結果は現在論文投稿準備中である。

The purity of the product is determined by the UV spectrum. UL56: Early endosome lipid membrane structure exists in the middle of the day. The purpose of this study is to determine the identity of UL56 and to predict and analyze its function. In this study, KIF1A, UL11 and UL56 of host side factors were studied. KIF-1A is involved in neurocyte-specific kinesin expression, lipid interaction in the C-terminal region, and transport of presynaptic vesicles. Yeast two-hybrid method, GST-pulldown method, fluorescent antibody method, KIF1A and UL56 interaction UL56 indicates the possibility of the presence of KIF1A in cytosol and its role in axonal transport. The results were published in the May 2005 issue of J. Gen. Virol. UL11 - 11 - 11 - 11 - 11 UL-11-N terminal part of the acid, acid, HSV-11 HSV-11 HSV GST-pulldown method, immuno-sedimentation method, fluorescent antibody method, UL56 and UL11 are used to form a complex of substances. The N-terminal part of UL11 is essential for complex formation, and lipid is essential for complex formation. The results above indicate the possibility that UL 56 may be responsible for HSV particle formation and HSV specific acquisition. The results are now being prepared for submission.