魚類のω-3型高度不飽和脂肪酸代謝における核内レセプターの機能解析

ω-3型高度不飽和脂肪酸(PUFA)は海産魚類の必須脂肪酸として働くが、その生理的な作用機構は不明である。近年、ω-3型PUFAが核内レセプターファミリーであるperoxisome proliferator activated receptor(PPAR)のリガンドとして働くことが明らかとなった。PPARは脂質代謝に重要な働きをもつことから、海産魚類ではω-3型PUFAがPPARを活性化させ、種々の代謝調節を行っている可能性が考えられる。そこで、本研究は水産上重要魚種であるトラフグを対象にPPARの機能解析を行うことを目的とした。哺乳類および両生類のPPARについては、高度不飽和脂肪酸および関連物質のほか様々な物質がその転写活性を促進する。一方、トラフグは4種類のPPAR、α1、α2、βおよびγを持っていたが、これらが他生物種PPARと同じ物質に対して反応するかどうかは不明であった。そこで、魚類培養細胞を用い、トラフグPPARのリガンド依存的な転写調節能を調べた。キンギョ培養細胞にトラフグPPAR発現プラスミド、および別途供与されたPPAR調節領域を組み込んだルシフェラーゼレポータープラスミドを導入し、他生物種のPPARα、βおよびγの活性化剤であるそれぞれWy-14643、ETYAおよびロシグリタゾンを含む培地中で一晩培養した。培養後、ルシフェラーゼ活性を測定したところ、トラフグPPARα1およびα2を導入した細胞でETYAの添加によりルシフェラーゼ活性が著しく上昇した。これらの細胞はWy-14643の添加によってもルシフェラーゼ活性が上昇したが、その応答はETYAに対するものより弱かった。また、トラフグPPARβおよびγは、上記3種類のPPAR活性化剤に対して反応しなかった。

ω-3型高度不飽和脂肪酸(PUFA)は海産魚類の必須脂肪酸として働くが、その生理的な作用機構は不明である。近年、ω-3型PUFAが核内レセプターファミリーであるperoxisome proliferator activated receptor(PPAR)のリガンドとして働くことが明らかとなった。PPARは脂質代謝に重要な働きをもつことから、海産魚類ではω-3型PUFAがPPARを活性化させ、種々の代謝調節を行っている可能性が考えられる。そこで、本研究は水産上重要魚種であるトラフグを対象にPPARの機能解析を行うことを目的とした。哺乳類および両生類のPPARについては、高度不飽和脂肪酸および関連物質のほか様々な物質がその転写活性を促進する。一方、トラフグは4種類のPPAR、α1、α2、βおよびγを持っていたが、これらが他生物種PPARと同じ物質に対して反応するかどうかは不明であった。そこで、魚類培養細胞を用い、トラフグPPARのリガンド依存的な転写調節能を調べた。キンギョ培養細胞にトラフグPPAR発現プラスミド、および別途供与されたPPAR調節領域を組み込んだルシフェラーゼレポータープラスミドを導入し、他生物種のPPARα、βおよびγの活性化剤であるそれぞれWy-14643、ETYAおよびロシグリタゾンを含む培地中で一晩培養した。培養後、ルシフェラーゼ活性を測定したところ、トラフグPPARα1およびα2を導入した細胞でETYAの添加によりルシフェラーゼ活性が著しく上昇した。これらの細胞はWy-14643の添加によってもルシフェラーゼ活性が上昇したが、その応答はETYAに対するものより弱かった。また、トラフグPPARβおよびγは、上記3種類のPPAR活性化剤に対して反応しなかった。