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1細胞計測を用いた細胞の表現型のダイナミックな変化の解析

使用单细胞测量分析细胞表型的动态变化

基本信息

批准号：
03J11954
负责人：
若本祐一
金额：
$ 1.73万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

(1)伸長表現型の後天的遺伝昨年度までに明らかにしていた、大腸菌伸長型表現型の後天的遺伝の現象を詳細に解析したところ、分裂時の細胞長10μmを境にそれ以下では等分裂、それ以上では不等分裂が起こり、通常表現型と伸長表現型を分ける細胞長或閾値が存在することが分かった。分子機構を考える為、分裂位置決定に関わるMinCDEタンパク質の細胞内での挙動をシミュレートすると、そのダイナミクスが細胞長7.5μmを閾値にそれ以上では不当分裂を誘導することが分かった。Minタンパク質がFtsZの細胞膜接着位置決定に関わることを考慮し、分裂時の長さにおける閾値を計算すると9.8μmとなり、実験結果と一致した。この結果は、閾値長さを獲得した細胞内ではMinタンパク質のダイナミクスが定性的に変化し、新たな表現型を安定化することを示しており、細胞の形状が後天的な表現型決定情報となっていることを示した。(2)細胞間コミュニケーションによる後天的情報の保持細胞の表現型決定に寄与する後天的情報は細胞内だけでなく、ある特定の相互作用状態を細胞間で作り出すことにより保持される可能性も考えられる。そこで、大腸菌の静止期環境に保持された拡散性シグナル因子による相互作用形式を対数増殖期の細胞に与え、細胞間コミュニケーションによる情報保持の有無を検討した。その結果、静止期環境中のシグナル因子は栄養非依存的に成長を10分以内に停止させることが分かった。シグナル因子濃度を下げて細胞に与えた場合、濃度に応じた抑制された成長速度を維持したことから、細胞は現在置かれた環境中のシグナル因子濃度に従って成長速度を調節していると考えられる。これは、シグナル因子濃度という情報が成長速度の決定因子であり、拡散性シグナル因子による細胞間コミュニケーションが後天的情報となることを示している。

(1) Elongation phenotype of acquired inheritance, detailed analysis of acquired inheritance of coliform elongation phenotype, and cell length during division Below 10μm, there is equal division, and above it, there is unequal division, and the normal phenotype is the elongation phenotype, where the cell length or threshold exists, and the division is divided. Molecular structure analysis, division position determination, molecular structure determination, division position determination, molecular structure determination, intracellular movement, division position determination, and molecular structure detection.ると, そのダイナミクスがThe cell length is 7.5μm and the threshold value is higher than the では improper division をinduced することが分かった. The location of the attachment of the cell membrane of FtsZ is determined by taking into account the details The length of the crack was calculated using the threshold value of 9.8μm, and the results were consistent.このRESULTS は、THRESHOLD LENGTH さをObtain したintracellular ではMinタンパクquality のダイナミクスがqualitative に変化し、新たなThe phenotype is stabilized and the shape of the cell is acquired. The phenotype determines the information. (2) Between cells, cells retain acquired information and transmit phenotype-determining cells and acquire acquired information. The specific interaction state between the cells is the same as the inner and outer cells.そこで, coliform's stationary environment, maintaining the された拡dispersion, シグナルfactor, によるinteraction form を対The number of cells in the reproductive stage and the information between cells are maintained. As a result, the のシグナル factor in the quiescent environment can support non-dependent growth and stop within 10 minutes. When the concentration of sera factor is low, the growth rate of sterilized cells is suppressed and the growth rate of sterilized cells is maintained.ら, the cells are now placed in the environment and the concentration of the factor and the growth rate are adjusted by the して and いるとtest.これは, シグナル factor concentration, というinformation, growth rate determining factor, であり, 拡dispersibility シグナル factor による intercellular コミュニケーションが acquired information となることをshow している.