マウス受精前核での遺伝子発現制御機構に関する研究

小鼠原核基因表达调控机制的研究

• 批准号: 03J50121
• 负责人: 岩瀬 茂樹
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J50121/
• 关键词: 初期胚発生; PFTF1; BHC80; ノックアウトマウス; クロマチン構造; クロマチンリモデリング; 転写抑制; 遺伝子発現調節; 受精卵; 前核期; マウス; 転写; ヒストン脱アセチル化; 前核

昨年に引き続き、受精後の前核期で転写される遺伝子を免疫沈降法によって単離する方法を試みた。しかし、量的問題を克服することができず、達成が困難となった。また、縮重PCRによる新規クロマチンリモデリング因子の単離および同定も断念せざるを得ない状況となった。そこで、初期胚におけるクロマチン構造の変化を担う可能性のあるタンパク質PFTF1/BHC80の機能解析を行った。PFTF1/BHC80ノックアウトマウスを作製したところ、初期胚発生には問題がなかったものの、新生児死を起こすことが明らかとなった。他グループからの報告によりPFTF1/BHC80は非神経細胞における神経特異的遺伝子の転写抑制を担うことが報告された。そこで、PFTF1/BHC80欠損マウスの肺における神経特異的遺伝子の発現量をRT-PCR分析により検討したところ、調べた4つの遺伝子のうちの1つシナプシンI(SynI)の異所的発現を認めた。さらに、クロマチン免疫沈降法によりPFTF1/BHC80がSynIのプロモーター領域に結合していることを証明した。これらの結果は、初期胚発生におけるクロマチン構造の維持を介した神経特異的遺伝子の転写抑制に、PFTF1/BHC80が部分的に貢献することを示唆している。

The method of immunoprecipitation was tested in the pre-nuclear stage after fertilization. To overcome the problem of quantity, to achieve the difficulty. A new method of PCR amplification was developed to determine the identity of the PCR amplification factor. The functional analysis of PFTF1/BHC80 is carried out in the early stage of the development of PFTF1/BHC80. PFTF1/BHC80 is the first time that a child has been born, and the second time that a child has been born. He reported that PFTF1/BHC80 is responsible for the inhibition of writing of nerve-specific genes in non-neuron cells. RT-PCR analysis was performed to detect the occurrence of neurospecific genes in the lungs of PFTF1/BHC80 and to identify the occurrence of neurospecific genes in the lungs of SynI (SynI). PFTF1/BHC80 is a new type of immuno-sedimentation method. The results show that the maintenance of early embryonic structure, the inhibition of neuro-specific gene expression and the partial contribution of PFTF1/BHC80 are important factors for the development of early embryonic structure.

项目成果

Regulation of LSD1 histone demethylase activity by its associated factors

• DOI: 10.1016/j.molcel.2005.08.027
• 发表时间: 2005-09-16
• 期刊: MOLECULAR CELL
• 影响因子: 16
• 作者: Shi, YJ;Matson, C;Shi, Y
• 通讯作者: Shi, Y