細胞分化制御因子の動物個体レベルにおける機能解析と発がんとの関係

动物个体水平细胞分化调节因子的功能分析及其与癌发生的关系

• 批准号: 15770120
• 负责人: 山本 華子
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15770120/
• 关键词: 分裂酵母; 異種間機能相補; 細胞分化; 細胞増殖; トランスジェニックマウス; T細胞; 免疫応答; Two-hybridシステム; patl温度感受性変異株; 出芽酵母; two-hybrid system; 分化; ROD1; Rcd1; K562

ROD1及びRCD1は共に、分裂酵母の分化異常温度感受性変異株から異種間機能相補クローニング法によって単離された高等動物の遺伝子である。分裂酵母内で分化/増殖に寄与する能力を示したこれらの遺伝子は、動物細胞内においてもやはり分化制御因子として機能する。ROD1はヒト細胞株K562に発現させると、巨核球・赤芽球への分化抑制能を示す。また、マウスの臓器の中でも、骨髄や脾臓など造血器官において顕著にタンパク発現量が高いことも特徴である。これらのことからROD1トランスジェニックマウスは、血球分化に何らかの異常を示すものと期待された。しかしながら、同世代四週齢ROD1トランスジェニックマウス二系統とそれらの野生型同腹子の比較を行ったところ、末梢血中の血球細胞分布に異常は認められなかった。これに続いて、外来抗原の投与によって免疫反応を惹起した場合の応答性を検討している。T細胞依存的な免疫応答を惹起するためにNP-CGG及びSRBC、そしてT細胞非依存的応答をみるための抗原としてDNP-ficollをそれぞれ腹腔内投与し、ELISAによって抗体価を測定する計画である。昨年度末の飼育施設のトラブルのために、本年度半ばまでSPFグレードのマウスが揃わず実験計画の遂行が大幅に遅れてしまっているが、現在は抗原の腹腔内投与まで完了し、経時的な血液採取の開始に至っている。一方、Rod1,Rcd1周辺因子の単離のために、出芽酵母のTwo-hybridシステムを用いたスクリーニングを行ってきた。Rod1についてはPCNA始め増殖に関係する幾つかの既知遺伝子が取れたもののその他の大多数と、Rcd1側のスクリーニングで得られた大半のものは機能不明な配列であった。今回のスクリーニングにはヒト骨髄由来ライブラリを購入/使用したが、ライブラリの種類や品質を検討し直す必要があると考えている。

ROD1 and RCD1 coexist, and are isolated genes of higher animals in the heterogeneous functional complementary cloning method of abnormally temperature-sensitive mutants of dividing yeast. The ability to differentiate and proliferate in yeast cells and the function of differentiation control factors in animal cells ROD1 was able to inhibit the differentiation of megakaryocytes and erythrocytes in K562 cells. The blood organs are characterized by high levels of blood pressure, high levels of blood pressure, and high levels of blood pressure. This is the first time I've ever seen an abnormal cell differentiation. The distribution of blood cells in peripheral blood was abnormal. The immune response to the presence of foreign antigens is discussed in this paper. T cell-dependent immune responses are initiated by NP-CGG and SRBC, and T cell-independent immune responses are initiated by DNP-ficoll, by intraperitoneal administration, and by ELISA. At the end of last year's breeding program, the SPF program was implemented in the middle of this year, and the intraperitoneal administration of antigen was completed. At the beginning of the blood sampling period, the SPF program was implemented in the middle of this year. A side, Rod1,Rcd1 cycle factor of separation, budding yeast of the Two-hybrid system to use in the middle of the list Rod1 is the first time that PCNA has been established. Most of the other members are known to have been established. Most of the members are unknown to Rcd1. This article reviews the origin of the product, the type of product, and the quality of the product.