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プラナリアにおける有性化因子に関する研究

涡虫性化因素的研究

基本信息

批准号：
15770147
负责人：
小林一也
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15770147/
关键词：
プラナリア無性生殖有性生殖有性化因子

项目摘要

扁形動物プラナリアの一種、リュウキュウナミウズムシ無性個体のクローン集団(OH株)に、有性生殖のみを行うイズミオオウズムシを餌として与えると、雌雄同体性の生殖器官が発達し、有性生殖を始めるようになる。体研究は有性個体に含まれている有性化因子を単離・同定することを目的としている。材料にはイズミオオウズムシおよび、イズミオオウズムシの投餌によって有性化した有性化OH個体を用いた。湿重量約4gの有性個体をPBS中で懸濁し、ユ00Kxgで遠心にかけた。その後、上清画分をSep-Pakカラム(tC18,Waters)に通した。純粋、10%MeOH、30%MeOH、100%MeOHの順に溶出すると、純粋画分と10%MeOH画分の両方に有性化活性が認められた。これら両画分を合わせた画分をM1画分とし、AKTA purifier(Amersham Bioscience)を用いて、逆相クロマトグラフィー(Symmetry^<【○!R】>C18,Waters)を行った。条件検討を重ねて、メタノール勾配による溶出をせずとも純粋を通すことにより、おおよそ20カラムボリューム付近で有性化因子が回収できることが分かった。この画分に対して、ゲル濾過クロマトグラフィー(Superdex^<TM> Peptide 10/300 GL, Amersham Bioscience)を行ったところ、有性化活性を示すピーク(紫外波長:220nm)をひとつに限定することができた。現在はこのピークを含んだ画分を収集中であり、ある程度量が貯まり次第、構造解析の予定である。また、前年度報告では、陰イオン交換樹脂に有性化因子が吸着することが示唆されていたが、今回、M1画分に対して、陰イオン交換クロマトグラフィー(RESOUCE^<TM> Q, Amersham Bioscience)を行ったところ、NaCl勾配0mM〜450mMの画分にOH個体を完全に有性化させられる活性が認められた。この結果も含めて、有性化因子は500Da以下の低分子で、若干の疎水性をもつ陰性物質であることがわかった。

A species of platyzoan, a group of asexual individuals (OH strain), sexual reproduction, development of hermaphroditic reproductive organs, initiation of sexual reproduction. The study of sexual individuals includes sexual factors, such as gender, gender and gender. The material is used as a sexual OH entity in the feeding of the material and the material. The wet weight is about 4 g and the sexual individual is suspended in PBS, and the distance is about 00Kxg. After the separation, the supernatant was separated into Sep-Pak and Water. Pure MeOH, 10% MeOH, 30% MeOH and 100% MeOH were dissolved in water. Pure MeOH and 10% MeOH were dissolved in water. Aka purifier(Amersham Bioscience) is used in reverse phase and in reverse phase. Symmetry^<[0! R]>C18,Waters). The condition is discussed in detail, and the dissolution of the solution is discussed in detail. The dissolution of the solution is discussed in detail, and the dissolution of the solution is discussed in detail. This kind of painting is divided into two parts: Superdex^<TM>Peptide 10/300 GL (Amersham Bioscience) and sexual activity (UV wavelength:220nm). Now, there are two kinds of structures: one is the order of storage, the other is the order of structural analysis. In the previous annual report, the adsorption of sexual factors on the anion exchange resin was detected. Now, M1 was detected. The adsorption of sexual factors on the anion exchange resin was detected.(RESOUCE^<TM>Q, Amersham Bioscience) was detected. The adsorption of sexual factors on the anion exchange resin was detected. The activity of sexual factors on the OH individual was completely detected when 0mM ~ 450mM was mixed with NaCl. The results include low molecular weight, sexual factors below 500Da, and certain water negative substances.