ゼブラフィッシュ神経系形成におけるWntシグナル活性化因子Ccd1の機能解析
Wnt信号激活因子Ccd1在斑马鱼神经系统形成中的功能分析
基本信息
- 批准号:15770137
- 负责人:
- 金额:$ 2.3万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
- 财政年份:2003
- 资助国家:日本
- 起止时间:2003 至 2005
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Wntシグナル伝達機構は、多細胞生物の発生時の軸形成や分化・誘導、シナプス形成に重要な役割を果たすことが知られている。我々が単離したCcd(Coiled-coil DIX)は、Wntシグナル(β-catenin経路)で鍵となるDvlとAxinの間に保存されている領域であるDIXドメインを持つ3番目のタンパク質である。昨年度までに、ゼブラフィッシュCcd1、Ccd2およびマウスCcd1を単離して、Ccd1にはアミノ酸構造の異なるサブタイプ(Ccd1A,B,C)があることを明らかにした。またゼブラフィッシュCcd1は、Wntシグナル(β-catenin経路)をin vitroとin vivoの両方で活性化する働きを持つ事も示した。今年度は、Ccdのサブタイプによる機能上の差があるのかどうか、Ccd2の生体内での役割は何であるのかを、培養細胞系とゼブラフィッシュを用いて解析した。まず、Hela細胞でゼブラフィッシュCcd2Aを発現させるとアクチンストレスファイバーと共局在すること、Ccd2Bはcytoplasmic vesicleに局在することを明らかにした。Aタイプはアクチンと結合すると考えられるCHドメインを持っているので、アクチンと結合することで何らかの働きをする事が考えられる。また培養細胞におけるLuciferase Assayにより、Ccd2のDIXドメインのみを持つようなタンパク質は、Wntシグナリングを抑制する事がわかった。またゼブラフィッシュ胚に、このタンパク質を過剰発現させると、Ccd1のDIXドメインと同様に胚の前方化が起きて眼や前脳領域が拡大し、生体内でもWntシグナリングを抑制することが明らかになった。現在は、ゼブラフィッシュCcd2AおよびCcd2Bを胚で過剰発現させて、どのような異常が生じるか、その表現型を解析し、Ccd2の生体内での機能を明らかにしようとしている。
Wnt gene expression mechanisms are important for the development of multicellular organisms, such as axis formation, differentiation, induction, and gene expression. Ccd(Coiled-coil DIX), Wnt (β-catenin), Dvl and Axin are the key elements in the domain of preservation. Last year, Ccd1, Ccd2 and Ccd1 were separated from each other and Ccd1 was separated from each other. The structure of Ccd1 was different from that of Ccd1A,B,C. Ccd1, Wnt,(β-catenin pathway), in vitro, in vivo, in vivo, in vivo. This year, Ccd2 has a functional difference, Ccd2 has a functional difference, and cultured cell lines have a functional difference. Ccd2A and Ccd2B are the two main components of the cytoplasmic vector. A: I'm sorry, but I'm sorry. I'm sorry. Luciferase Assay for cultured cells, Ccd2 DIX assay, and Wnt assay inhibition In vivo, the expression of Wnt is inhibited by the expression of Wnt. Now, CCD2A and CCD2B have been developed, abnormal production and phenotype analysis, and the function of CCD2 in vivo has been clarified.
项目成果
期刊论文数量(5)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Shiomi, K., Uchida, H., Keino-Masu, K., Masu, M.: "Ccd1, a novel protein with a DIX domain, is a positive regulator in the Wnt signaling during zebrafish neural patterning."Current Biology. 13. 73-77 (2003)
Shiomi, K.、Uchida, H.、Keino-Masu, K.、Masu, M.:“Ccd1 是一种具有 DIX 结构域的新型蛋白质,是斑马鱼神经模式形成过程中 Wnt 信号传导的正向调节因子。”《当代生物学》。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
Expression of mouse Coiled-coil-DIX1 (Ccd1), a positive regulator of Wnt signaling, during embryonic development.
- DOI:10.1016/j.modgep.2005.06.013
- 发表时间:2006-03
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:K. Soma;Kensuke Shiomi;K. Keino‐Masu;M. Masu
- 通讯作者:K. Soma;Kensuke Shiomi;K. Keino‐Masu;M. Masu
Identification and differential expression of multiple isoforms of mouse Coiled-coil-DIX1 (Ccd1), a positive regulator of Wnt signaling
- DOI:10.1016/j.molbrainres.2004.12.002
- 发表时间:2005-04-27
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Shiomi, K;Kanemoto, M;Masu, M
- 通讯作者:Masu, M
Identification and differential expression of multiple isoforms of mouse Ccd1 (Coiled-coil-DIX1), a positive regulator of Wnt signaling.
小鼠 Ccd1 (Coiled-coil-DIX1) 多种亚型的鉴定和差异表达,Ccd1 是 Wnt 信号传导的正调节因子。
- DOI:
- 发表时间:2005
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Shiomi K;Kanemoto M;Keino-Masu K;Yoshida S;Soma K;Masu M.
- 通讯作者:Masu M.
Genetic marking of hematopoietic stem and endothelial cells : Identification of the Tmtsp genes encoding a novel cell-surface protein with the thrombospondin-1 domain.
造血干细胞和内皮细胞的遗传标记:鉴定编码具有血小板反应蛋白-1 结构域的新型细胞表面蛋白的 Tmtsp 基因。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Sumazaki R;Shiojiri N;Isoyama S;Masu M;Keino-Masu K;Osawa M;Nakauchi H;Kageyama R;Matsui A.;Takayanagi S. et al.
- 通讯作者:Takayanagi S. et al.
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