权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

コーヒー含有二次代謝産物(ポリフェノール類)の生合成機構の解明

阐明咖啡次生代谢物（多酚）的生物合成机制

基本信息

批准号：
15780076
负责人：
水野幸一
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Akita Prefectural University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15780076/
关键词：
カフェインコーヒーポリフェノール cDNA メチルトランスフェラーゼ

项目摘要

コーヒーの果実を材料に、その登熟段階を追ってポリフェノールの生合成が活発な時期を特定する目的で、その増減と同調しているとの報告があるカフェイン生合成において、鍵酵素である最初のメチル化を司る7-メチルキサントシンシンターゼの遺伝子発現について詳しく調べた。開花日から開花後40日までの果実を採集し、全RNAを抽出し、7-メチルキサントシンシンターゼのcDNAをプローブとしたノーザンブロット分析を行なった結果、そのmRNA量は開花直後から急激に増加し、開花後5日目付近で最大となりその後は緩やかに減少していた。当初予想したように、果実の登熟初期から発現していたものの、開花後一週間以内の短い期間で最大となっていたことは驚きであった。これを指標として、カフェイン合成が最も盛んな時期と合成開始初期の果実、つまり開花後5日と開花日の果実からそれぞれ調製したRNAを用いてcDNA-AFLPを行い、発現量に差の見られる遺伝子群を網羅的に単離した。7-メチルキサントシンシンターゼと同様の発現パターンを示す候補遺伝子、つまり開花後急激に発現量が増大する遺伝子の配列を合計259個解析し、重複するものやartifactを除いて最終的に177遺伝子を単離することに成功した。得られたDNA断片について相同性検索を行い、既知遺伝子と相同性の見られたものが105個、相同性の見られない新規のものが72個であった。相同性の見られたもののうちポリフェノール類の合成に関与している可能性が推測される遺伝子断片数種類について、それらの配列情報をもとにRACE法等を用いて遺伝子の全長を得ている。

The results of the study include: material, maturity stage, synthesis, activity stage, specific purpose, increase, homology, report, synthesis, key enzyme, initial transformation, 7-cell transformation, gene development, detailed regulation, etc. The results showed that the amount of total RNA extracted from the fruit at 40 days after flowering increased rapidly after flowering, and decreased slowly after 5 days after flowering. In the early stages of flowering, the maximum period of flowering occurs within a week. The index of DNA synthesis is the highest peak period, the initial period of synthesis, the 5 th day after flowering, the initial period of synthesis, the 5 th day after flowering, the initial period of synthesis, the 5 th day after flowering, the initial period of synthesis, the 5 th day after flowering, the initial period of synthesis, the 7. The number of candidate genes, the number of post-flowering emergent genes, and the number of repeat genes increased. The total number of candidate genes was 259. The number of repeat genes was 177. The number of candidate genes was 177. There were 105 known DNA fragments and 72 new DNA fragments. The identity of the gene fragments is determined by the RACE method, and the length of the gene fragments is determined by the RACE method.