頚動脈小体主細胞のガス受容に伴う細胞内Ca^<2+>の動態とイオンチャネルの役割

颈动脉体主细胞内Ca^<2+>动态及与气体接收相关的离子通道的作用

基本信息

批准号：
15780185
负责人：
山本欣郎
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Iwate University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

イメージングの実験ではチューブに金属管を用いたり還流液を吸引したりする等の装置の改良をすることにより、fura-2を用いたカルシウム変動に成功した。これまでの多くの報告の通り、低酸素還流液により頚動脈小体主細胞の細胞内カルシウムの上昇が観察されたが、多くの場合興奮は標本内で一定で、細胞内カルシウムの減少が見られる場合は少なかった。また、低酸素付加がTASKチャネルに作用することが強く示唆されたため、現在リアルタイムRT-PCR法を用いて頚動脈小体におけるTASK-1とTASK-3のmRNA変動を解析している。また、TASKと類似の2ポアカリウムチャネルであるTREK-1チャネルの発現を論文発表した。二酸化炭素受容チャネルの内向き整流カリウムチャネルKirに関しては、前年度発現を確認したKir4.1に加えてKir5.1の発現が確認されるとともに、免疫組織化学的にこれらのチャネルは主細胞に共発現することがわかつた。Kir4.1-Kir5.1ヘテロマーは生体のpH変動範囲内で反応するチャネルなので、頚動脈小体主細胞ではKir4.1-Kir5.1のヘテロマーを形成して二酸化炭素受容に強く関わると考えられた。この成績は中枢化学受容野の成績とは異なっており、頚動脈小体の二酸化炭素受容系でユニークなチャネルと考えられる。さらに、頚動脈小体の調節系としてNOと活性酸素体が関わることをスライス培養系で確認し、論文発表した。この成績は現在リアルタイムイメージングで検討を加えている。

在成像实验中，使用Fura-2的钙波动通过改进设备成功实现，例如将金属管用于管子和吸气回流溶液。正如过去报道的那样，低氧反流液显示颈动脉体主细胞中细胞内钙的增加，但是在大多数情况下，样品内的激发是恒定的，在少数情况下，细胞内钙的降低。此外，强烈建议缺氧在任务渠道上起作用，因此我们目前正在使用实时RT-PCR分析颈动脉体中任务1和任务3的mRNA变化。此外，该论文发表了Trek-1通道的表达，这是一种类似于任务的两孔钾通道。关于内部整流的钾通道KIR（即二氧化碳受体通道），除了Kir4.1之外，还确认了Kir5.1的表达，而Kir4.1已证实，这已证实在上一年已表达，并且发现这些通道在主细胞中是免疫组化的。由于KIR4.1-KIR5.1杂体是在生物生物体的pH范围内响应的通道，因此人们认为在颈动脉体中，Kir4.1-KIR5.1的异构体形成并强烈参与二氧化碳接受。这种性能与中央化学感受器场的性能不同，被认为是颈动脉体的二氧化碳受体系统中的独特通道。此外，切片培养系统证实，没有活跃的氧体是颈动脉体的调节系统，并发表了一篇论文。目前正在通过实时成像对此成就进行检查。