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ナメクジ長期記憶関連遺伝子群のカタログ化

编目与蛞蝓长期记忆相关的基因

基本信息

批准号：
15790036
负责人：
松尾亮太
金额：
$ 2.24万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790036/
关键词：
長期記憶遺伝子発現前脳嗅覚-忌避学習 differential display

项目摘要

本年度においては、ナメクジの嗅覚忌避学習に重要であるとされる前脳葉機能解析、および遺伝子機能解析のためのRNAi法の確立に成功したので、以下に報告する。1.ナメクジ中枢神経系において、前脳葉は嗅覚学習に重要であるとされてきたが、技術的な困難から、これまでに決定的な証拠は得られていなかった。研究代表者らは、麻酔下のナメクジの前脳葉を両側性に破壊し、回復させたナメクジを用いて学習実験を行うことに成功した。まず前脳葉破壊後、7日目にニンジンをCS、キニジン溶液をUSとして条件付けし、翌日の記憶保持を調べた。その結果、擬手術群に比べて前脳葉破壊群ではニンジンからの忌避率が有意に低下していた。また、条件付け後、3時間後、1日後、3日後、7日後のいずれかに前脳葉を破壊し、その3日後の記憶保持を調べたところ、いずれの条件においても擬手術群に比べて前脳葉破壊群ではニンジンからの忌避率が有意に低下していた。以上の結果から、ナメクジの前脳葉は嗅覚忌避学習記憶の保持または想起に必要な脳部位であることが明らかになった。2.ナメクジでは、遺伝子抑制技術として長鎖dsRNAを体腔にinjectionする方法が、限られた条件のもとで有効であることが知られていた。しかしこの方法では、injectionした部位近傍においてのみ、限られた遺伝子についてだけ効果があり、中枢神経系では効果がないことが分かっていた。研究代表者らはこういった制限を克服するため、ガラス微少管を用いた微量注入を前脳葉に適用し、さらに化学合成されたsiRNAをリポフェクション試薬と混合して使用した。そして高カリウム刺激によって発現誘導されることが知られている転写因子C/EBPの発現が、injectionした翌日のナメクジ脳では抑制されることが見いだされた。さらにこの抑制効果は標的遺伝子特異的であることが示された。本研究により、in vivoのナメクジ脳において、特異的な遺伝子発現抑制が可能であることが明らかになった。

This year's successful establishment of RNAi methods for the analysis of leaf function and gene function is reported below. 1. The central nervous system is important for learning, technical difficulties, and decisions. The research representatives were successful in the study of the first half of the year. Before and after the event, 7 days after the event, the event will be held in the US and the next day. The results showed that the rate of avoidance was significantly lower than that of the control group. After 3 days, 1 day, 3 days, 7 days, the memory retention rate of the pre-operation group is intentionally lower than that of the pre-operation group. The above results show that the former leaves of the brain avoid learning and memory retention. 2. The technology of gene suppression and long chain dsRNA injection in body cavity The method of injection is close to the site, and the effect of injection is limited. The effect of injection is limited. The central nervous system is limited. The researchers were able to overcome these limitations by microinjection, chemical synthesis, and mixing. The expression of factor C/EBP was induced by high level stimulation, and the expression of factor C/EBP was inhibited by high level stimulation. This is the first time I've ever seen a woman. In this study, the inhibition of gene expression in vivo and in vivo was studied.