脂肪組織の脂質代謝におけるアセトアセチルCoA合成酵素の生理的意義の解明

阐明乙酰乙酰辅酶A合酶在脂肪组织脂质代谢中的生理意义

• 批准号: 15790054
• 负责人: 山崎 正博
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hoshi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790054/
• 关键词: ケトン体; 脂肪組織; 転写因子; 性ホルモン

本年度はアセトアセチルCoA合成酵素の脂肪組織における生理的意義の解明を目的に、以下のような実験を行った。本酵素の脂肪組織における影響を見る目的で、本酵素遺伝子の一過性過剰発現系の構築を目指した。昨年度のsiRNA法と同様にリポフェクション法による外来遺伝子の導入によって前駆脂肪細胞(3T3-L1細胞)における本酵素遺伝子の過剰発現を行ったが、脂肪細胞の短期間の培養では目立った表現系は観察されなかった。また、長期間培養では内在性AACSの発現量に減少傾向が見られた。現在、長期間に渡りsiRNA及び本酵素遺伝子が安定に発現する系の構築を試みている。また、本酵素遺伝子の上流配列に存在する転写活性化部位の同定をルシフェラーゼアッセイ法により検討した。その結果、脂肪細胞分化時にはC/EBP類の結合する配列が特に重要であることを示唆するデータが得られた。今後、ゲルシフトアッセイ法を用いて詳しい検討を行う予定である。また、本酵素遺伝子は他の組織に比べ雄の皮下脂肪組織において顕著に高発現していることが明らかになっている。本年度は脂肪細胞の大きさと本酵素遺伝子の発現量の相関関係という観点から検討を行った。成体ラットより脂肪組織を摘出し、脂肪細胞の直径によって四段階に分け、各々の本酵素遺伝子発現量を雌雄で比較した。その結果、本酵素遺伝子は主に直径100μmの脂肪細胞で発現していることが明らかとなった。また、腸間膜部ではどの大きさの脂肪細胞でも本酵素遺伝子発現量に雌雄で変化は無かったが、皮下部では200μm以上の大きさを持つ脂肪細胞で雄でのみ顕著な発現が見られた。このことから、本酵素遺伝子は雄の皮下部に存在する巨大脂肪細胞で特異的な発現をすることが明らかとなった。今後は、脂肪細胞の大きさと本酵素による脂質合成への影響、並びに性ホルモン類との間にある関係を解明することを目指して実験を進める予定である。

This year は ア セ ト ア セ チ ル CoA synthetic enzyme の adipose tissue に お け る physiological significance の interpret に を purpose, the following の よ う な be 験 を line っ た. This enzyme has a における effect on adipose tissue を as seen in る objective で, the 伝 seed of this enzyme has a transient overoccurrence, which is related to the construction of を finger た. Yesterday annual の と siRNA method with others に リ ポ フ ェ ク シ ョ ン method に よ る foreign heritage 伝 son の import に よ っ て 駆 before fat cells (3 t3 - L1 cell) に お け る traces of this enzyme 伝 son ever の turning 発 line now を っ た が の short, fat cells during の cultivate で は item set っ た performance department は 観 examine さ れ な か っ た. Youdaoplaceholder0, long-term cultivation of で で intrinsic AACS に occurrence amount に reduction tendency が see られた. Now, long-term に cross between り siRNA and び traces of this enzyme 伝 が son settle に 発 now す る is の build を try み て い る. ま た, this enzyme but 伝 の LiuPei column に exist on す る の planning write activeness parts with fixed を ル シ フ ェ ラ ー ゼ ア ッ セ イ method に よ り beg し 検 た. そ の result, adipocyte differentiation に は C/EBP の combining す る match column が に important で あ る こ と を in stopping す る デ ー タ が have ら れ た. In the future, the ゲ, シフトアッセ and シフトアッセ methods will be used to determine を in detail by ゲ て and を by 検. ま た, this enzyme but 伝 は he に の organization than male べ の subcutaneous adipose tissue に お い て 顕 with high に 発 now し て い る こ と が Ming ら か に な っ て い る. This year, the <s:1> large <s:1> さと of <s:1> adipocytes さと and the occurrence amount of 伝 of this enzyme <s:1> are related to the と う観 う観 points ら検 ら検 and を lines った. Adult ラ ッ ト よ り を of adipose tissue to pick out the し, fat cells の diameter に よ っ て four Duan Jie に け, each 々 の traces of this enzyme 伝 is the male and female で 発 now quantity を し た. Heritage そ の results, the enzyme 伝 は に Lord son 100 microns in diameter の fat cells で 発 now し て い る こ と が Ming ら か と な っ た. ま た, intestinal membrane between で は ど の big き さ の fat cells で も amount of this enzyme but 伝 son 発 now に male and female で variations change は no か っ た が, subcutaneous で は 200 microns above の き さ を hold つ fat cells で male で の み 顕 the な 発 が now see ら れ た. こ の こ と か ら, this enzyme but 伝 は male の subcutaneous part に exist す る big fat cells で specific な 発 now を す る こ と が Ming ら か と な っ た. Future は, big fat cells の き さ と this enzyme に よ る lipid synthesis へ の influence, and び に sex ホ ル モ ン class と の between に あ る masato is を interpret す る こ と を refers し て be 験 を into め る designated で あ る.