プロテアリーム阻害物質チロペプチン類縁体による細胞内蛋白質の変動と生物活性

蛋白质抑制剂酪肽素类似物引起的细胞内蛋白质和生物活性的变化

• 批准号: 15790059
• 负责人: 百瀬 功
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Microbial Chemistry Research Foundation
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790059/
• 关键词: プロテアソーム阻害物質; チロペプチン; 薬剤耐性; プロテアソーム

昨年度までの研究により、プロテアソーム阻害物質チロペプチン類縁体TP-110は、プロテアソームを強く阻害し、in vitroで癌細胞の増殖を強く抑制することが分かった。TP-110に対する耐性機序を解析することは、TP-110を用いた有効ながん治療方法の開発に繋がると考えられることから、本年度はTP-110に対する耐性細胞を作製し、その特異的蛋白質の変動を解析した。ヒト多発性骨髄腫RPMI8226細胞をTP-110に長期間暴露し耐性株を樹立した。その耐性株はTP-110に対して約10倍の耐性を示し、他のプロテアソーム阻害剤であるMG-132に対しては3倍、bortezomibに対しては2倍の耐性を示した。既存抗がん剤であるdoxorubicinに対しては40-120倍、taxolに対しては375-500倍と非常に強い交差耐性を示した。そこでDNAマイクロアレイによる発現解析を行なったところ、薬剤排出ポンプ蛋白質MDR1をコードする遺伝子ABCB1が耐性株において発現が顕著に増加していることが分かった。それはRT-PCRおよびウェスタンブロット法によっても確認することができた。そこでMDR1の阻害剤であるverapamilをTP-110耐性株に作用させたところ、TP-110への耐性が10倍から1.8倍に低下し、MG-132においても3.8倍から1.0倍に、bortezomibにおいても1.6倍から1.0倍に低下した。またMDR1過剰発現ヒト白血病K562/ADM細胞はMDR1を発現していないK562細胞に比べてTP-110に対して91倍の耐性を示した。またMG-132に対しては3.0倍、bortezomibに対しては4.0倍の耐性を示した。以上、プロテアソーム阻害剤TP-110に対する耐性株を作製し、その耐性機序にABCB1/MDR1が関与していることを明らかにした。

Yesterday annual ま で の research に よ り, プ ロ テ ア ソ ー ム resistance against material チ ロ ペ プ チ ン class try TP - 110 は, プ ロ テ ア ソ ー ム を く strong resistance against し, in vitro で cancer の raised strong colonization を く inhibit す る こ と が points か っ た. TP - 110 に す seaborne る patience machine sequence analytical す を る こ と は, TP - 110 を い た have sharper な が ん treatment の open 発 に 繋 が る と exam え ら れ る こ と か ら, this year's は TP - 110 に す seaborne る patience し, the cell を cropping そ の specific protein の - dynamic analytical し を た. Youdaoplaceholder0 multiple osteomatoma RPMI8226 cells をTP-110に long-term exposure to immute-tolerant strains を establishment of <s:1> た. そ の patience strains は TP - 110 に し seaborne て の patience を し, about 10 times he の プ ロ テ ア ソ ー ム resistance against tonic で あ る MG - 132 に し seaborne て は 3 times, bortezomib に し seaborne て は 2 times の patience を shown し た. Existing resistance が ん tonic で あ る doxorubicin に し seaborne て は 40-120 times, taxol に し seaborne て は 375-500 times と very strong に い job patience を shown し た. そ こ で DNA マ イ ク ロ ア レ イ に よ る 発 now line analytical を な っ た と こ ろ, 薬 tonic discharge ポ ン プ protein MDR1 を コ ー ド す る posthumous son 伝 ABCB1 が patience strains に お い て 発 now が 顕 with に raised し て い る こ と が points か っ た. Youdaoplaceholder0 それ RT-PCRおよびウェスタ ブロット ブロット ブロット によって によって confirmation する とがで とがで とがで た た た. そ こ で MDR1 の resistance against tonic で あ る verapamil を TP - 110 patient strains に role さ せ た と こ ろ, TP - 110 へ の 10 times patience が か ら 1.8 times lower に し, MG - 132 に お い て も 3.8 times か ら 1.0 times に, bortezomib に お い て も 1.6 times か ら low に し 1.0 times Youdaoplaceholder0. ま た MDR1 before turning 発 now ヒ ト leukemia K562 / ADM cells は MDR1 を 発 now し て い な い に K562 cells than べ て TP - 110 に し seaborne て 91 times の patience を shown し た. Youdaoplaceholder0 MG-132に against て て 3.0 times and bortezomibに against て て 4.0 times <s:1> tolerance を showed た. Above, プ ロ テ ア ソ ー ム resistance against one of TP - 110 に す seaborne る patience plant し the を cropping, そ の patience machine sequence に ABCB1 / MDR1 が masato and し て い る こ と を Ming ら か に し た.

项目成果

Structure-based design of derivatives of tyropeptin A as the potent and selective inhibitors of mammalian 20S proteasome

• DOI: 10.1016/j.bmcl.2005.02.013
• 发表时间: 2005-04-01
• 期刊: BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS
• 影响因子: 2.7
• 作者: Momose, I;Umezawa, Y;Ikeda, D
• 通讯作者: Ikeda, D