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EBウイルス関連腫瘍における細胞障害性T細胞の認識抗原の病理組織学的同定

EBV 相关肿瘤中细胞毒性 T 细胞识别的抗原的组织病理学鉴定

基本信息

批准号：
15790178
负责人：
山下依子
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

Angioimmunoblastic lymphoma(AILD-T)はEBウイルスが関与しているとされるT細胞性リンパ腫瘍であるが、多彩な臨床症状を呈し反応性病変からの連続的移行が示唆されている。病理組織学的にも腫瘍細胞以外の細胞が混在し、腫瘍細胞の同定が困難である。EBウイルスの腫瘍細胞への感染や腫瘍化への関与についての詳細は未だ明らかでない。我々は4例のAILD-Tについてsingle cell PCR法を用いてTCRγ遺伝子の解析を行った。まず、EBER in situ hybridizationを行いEB陽性細胞を同定し、実体顕微鏡下で一個ずつ細胞を採取した。これを鋳型としてseminested PCR法にて再構成されたTCRγ遺伝子、免疫グロブリン遺伝子及びコントロールとしてβアクチン遺伝子を増幅した。PCR産物をTAクローニングし、塩基配列の解析を行った。また、EBER以外にCD3,CD4,CD8陽性細胞についてTCRγの再構成を中心に同様の方法で解析した。結果として、AILD-TにおけるEBウイルス陽性細胞の20%程度がTCRγ遺伝子の再構成を示し、免疫グロブリン遺伝子再構成は2%程度に認められ、AILDではEBウイルスはT細胞、、B細胞両者に存在することが明らかとなった。ClonalityはTCRγのみで認められ、免疫グロブリン遺伝子はpolyclonalであった。興味深いことに、一部の症例では腫瘍細胞ごとにTCRγのV領域、J領域の塩基配列が一致しており、N領域のみが異なっていた。AILD-TはCD4陽性のT細胞性腫瘍であることが知られているが、CD4,CD8陽性細胞について調べると、CD4陽性細胞でのみclonalityが確認された。ただしCD8陽性細胞でもV, J領域のファミリーが類似しており、何らかの共通抗原の存在が示唆された。

Angioimmunoblastic lymphoma (AILD) は EB ウイルスが masato and しているとされる T cell sex リンパ swollen sores であるが, colorful な clinical symptoms をし anti 応 STD - からの even 続 transitional が in stopping されている. In histopathology, the に abscess cells outside the abscess cells are mixed with が, and it is difficult to determine the が of the abscess cells が. EB ウイルスの swollen sores cells への infection や swollen sores change への masato and についての detailed は not だ Ming らかでない. I 々を 4 cases of <s:1> AILD-Tににをててsingle cell PCR method を using <s:1> てTCRγ trace 伝 <s:1> to analyze を lines った. Youdaoplaceholder0, EBER in situ hybridizationを for を co-localization of <s:1> eB-positive cells を, in vivo 顕 microscopically で one ずを cell を for <s:1> た. Type これを where として seminested PCR method にて reconstitution された TCR gamma heritage 伝, immune グロブリン heritage 伝 son and びコントロールとして beta アクチン heritage 伝 son を rights of した. The PCR product をTA ロロニニググロ, and the analysis of the base sequence を row った. また and EBER に CD3, CD4, CD8 positive cells について TCR gamma の again constitute を center に with others の way で parsing した. Results として, AILD -t における EB ウイルスの 20% degree of positive cells が TCR gamma heritage 伝 son の reconstitution をし, immune グロブリン heritage 伝 son to constitute 2% は degree に recognize められ, AILD では EB ウイルスは T cells, B cells that struck the に exist することが Ming らかとなった. Clonality められ TCRγ <s:1> みで recognizes められ, is immune to グロブリグロブリ伝 and 伝 polyclonalであった. Fun deep いことに cases, a のでは swollen sores cells ごとに TCR gamma の V, J の salt base consistent with column がしており, N のみが different なっていた. AILD -t は CD4 positive の T cell sex is swollen sores であることが know られているが, CD4, CD8 positive cells について adjustable べると, CD4 positive cells でのみ clonality が confirm された. ただし CD8 positive cells でも V, J field のファミリーが similar しており, らかの common antigen の exist が in stopping された.