新規NFAT活性化因子Nfam-1のin vivoにおける機能解析

新型 NFAT 激活剂 Nfam-1 的体内功能分析

• 批准号: 15790257
• 负责人: 竹内 新
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790257/
• 关键词: NFAT; Nfam-1; ノックアウトマウス; 顆粒球; キメラ分子

本研究では、新規NFAT活性化分子として単離したNfam-1が生体内でリンパ球の分化や免疫応答にどのように関与するのか、Nfam-1遺伝子導入マウスや欠損マウスを用いて解明することを目的としている。これまでのNfam-1欠損マウスのT、B細胞を主とした表現型の比較及び機能解析では、いずれの細胞の解析においても、野生型マウスとの間に明確な違いは認められず、新たな実験系の検討が課題であった。T、B細胞と類似のシグナル伝達系が存在している顆粒球にNfam-1が最も強く発現していることが判明し、顆粒球の機能解析を通してNfam-1作用機序の解明を目指した。fMLP、TNFα刺激により放出される活性酸素量を比較し、インテグリン依存性のシグナル伝達系について検討したが、欠損マウス由来の顆粒球にも野生型と同程度の活性化が認められた。更にTNFα刺激によるインテグリンの活性化、発現上昇についても検討したが、こちらも同程度であった。インテグリンを介したインサイドアウト、アウトサイドインシグナルへのNfam-1の関与は低い可能性が示唆された。一方、直接NFATの活性化に関与する系の解析として、Fcレセプター、fMLP刺激によるカルシウムの流入の測定を行った。Nfam-1がNFAT活性化に関与する分子であることから、欠損マウスでの活性の低下が期待されたが、どちらの刺激においても野生型マウスとの差を認めることは出来なかった。以上より、遺伝子導入マウスや細胞の解析からNfam-1がNFATの活性化に関与し、B細胞の分化に重要な役割を果たしていることが解明されたが、欠損マウスからの解析においては、野生型マウスとの間に明確な違いを認めることは出来なかった。異なるシグナル伝達分子がNfam-1と代用されることで、複雑な免疫応答反応を維持している可能性が示唆された。

This study で は, new rules NFAT activation molecular と し て 単 from し た Nfam - 1 が born in vivo で リ ン パ ball の differentiation や immune 応 answer に ど の よ う に masato and す る の か, but 伝 Nfam - 1 import マ ウ ス や owe loss マ ウ ス を with い て interpret す る こ と を purpose と し て い る. Owe こ れ ま で の Nfam - 1 loss マ ウ ス の を Lord of T and B cells と し た phenotype の compare and び function analytical で は, い ず れ の cells の parsing に お い て も, wild type マ ウ ス と の に clear between な violations い は recognize め ら れ ず, new た な be 験 is の beg が 検 subject で あ っ た. T and B cells と similar の シ グ ナ ル 伝 da system exist が し て い る particles ball に が Nfam - 1 the most strong も く 発 now し て い る こ と が.at し, particle ball の functional analytic を tong し て Nfam role - 1 machine sequence の interpret を refers し た. FMLP, TNF alpha stimulation に よ り release さ れ る active acid quantity を compare し, イ ン テ グ リ ン dependency の シ グ ナ ル 伝 da system に つ い て beg し 検 た が, owe damage マ ウ ス origin の particles ball に も wild-type と with degree の activeness が recognize め ら れ た. More に TNF alpha stimulus に よ る イ ン テ グ リ ン の activeness, 発 now rising に つ い て も beg し 検 た が, こ ち ら も with degree で あ っ た. イ ン テ グ リ ン を interface し た イ ン サ イ ド ア ウ ト, ア ウ ト サ イ ド イ ン シ グ ナ ル へ の Nfam - 1 の masato が with low は い possibilities in stopping さ れ た. Side, direct NFAT の activeness に masato and す る is の parsing と し て, Fc レ セ プ タ ー, fMLP stimulation に よ る カ ル シ ウ ム の inflows の line measurement を っ た. Nfam - 1 が NFAT activation に masato and す る molecular で あ る こ と か ら, owe damage マ ウ ス で の active low の が expect さ れ た が, ど ち ら の stimulus に お い て も wild-type マ ウ ス と の poor を recognize め る こ と は out な か っ た. Above よ り, but 伝 import マ ウ ス や cells の parsing か ら Nfam - 1 が NFAT の activeness に masato and し, B cells の に important な "を cut fruit た し て い る こ と が interpret さ れ た が, owe damage マ ウ ス か ら の parsing に お い て は, wild type マ ウ ス と の に clear between な violations い を recognize め る こ と は out な か っ た. Different な る シ グ ナ ル 伝 operatives が Nfam - 1 と substitute さ れ る こ と で, complex 雑 な immune 応 answer against 応 を maintain し て い が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

Overexpression of human acyl-CoA thioesterase upregulates peroxisome biogenesis.

人酰基辅酶A硫酯酶的过度表达上调过氧化物酶体生物合成。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Experimental Cell Research 297(1)
• 作者: Ichimura;Y.;Imanura;Y.;Emoto;K.;Umeda;M.;Noda;T;Ohsumi;Y.;Ishizuka M. et al.
• 通讯作者: Ishizuka M. et al.

Ishizuka, M.: "Overexpression of human acyl CoA thioesterase upregulates peroxisome biogenesis."Exp.Cell.Res.. (In press). (2004)

Ishizuka, M.：“人酰基 CoA 硫酯酶的过度表达上调过氧化物酶体生物合成。”Exp.Cell.Res..（正在出版）。

Defective function of GABA-containing synaptic vesicles in mice lacking the AP-3B clathrin adaptor.

缺乏AP-3B网格蛋白适配器的小鼠中含GABA的突触囊泡的功能不良。

• DOI: 10.1083/jcb.200405032
• 发表时间: 2004-10-25
• 期刊: JOURNAL OF CELL BIOLOGY
• 影响因子: 7.8
• 作者: Nakatsu, Fubito;Okada, Motohiro;Mori, Fumiaki;Kumazawa, Noriko;Iwasa, Hiroto;Zhu, Gang;Kasagi, Yasufumi;Kamiya, Haruyuki;Harada, Akihiro;Nishimura, Kazuhiro;Takeuchi, Arata;Miyazaki, Taisuke;Watanabe, Masahiko;Yuasa, Shigeki;Manabe, Toshiya;Wakabayashi, Koichi;Kaneko, Sunao;Saito, Takashi;Ohno, Hiroshi
• 通讯作者: Ohno, Hiroshi

NFAM1, a new ITAM^+ surface molecule that regulates development and signaling of B lymphocytes.

NFAM1 是一种新的 ITAM^ 表面分子，可调节 B 淋巴细胞的发育和信号传导。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Proc.Natl.Acad.Sci.USA 101・(21)
• 作者: Ichinohe Takeshi et al.;Takasuka Naomi et al.;Ishizuka M. et al.;Ohtsuka M. et al.
• 通讯作者: Ohtsuka M. et al.