胃癌の分子標的に対する系統的モノクローナル抗体作成とその診断・治療への応用

胃癌分子靶点单克隆抗体的系统制备及其在诊断和治疗中的应用

• 批准号: 15790339
• 负责人: 筆宝 義隆
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790339/
• 关键词: 胃癌; ムチン; マイクロアレイ; モノクローナル抗体; 腫瘍マーカー; MUC13; WWOX; 癌抑制遺伝子

本研究では胃癌手術検体を用いたマイクロアレイ解析で、まず高発現の遺伝子を抽出した。このうち、ムチン蛋白であるMUC13は最近同定された1回膜貫通蛋白だが、(1)ムチンファミリー遺伝子であるMUC16が腫瘍マーカーCA125の抗原であること、(2)MUC1が抗体治療の標的としてすでに臨床試験が行われていること、などから診断・治療の標的として有望と考えて、モノクローナル抗体を多数クローン作成してさらに解析を行った。3種類の抗体を用いて各種細胞株でMUC13蛋白の評価を行ったところ、全長の200kDa蛋白以外よりも35kDaの蛋白が最も多く存在し、切断された断片の存在が示唆され診断マーカーとしての可能性が示された。Western blottingで非癌部と比較して胃癌組織での発現亢進を蛋白レベルでも確認した。免疫組織化学解析ではMUC13は小腸、大腸で陽性を示し、正常胃粘膜では陰性だった。Tissue arrayを用いて114例の検討を行ったところ、74例(65%)の胃癌で陽性を示し、Diffuse typeに比較してIntestinal typeで有意に発現が高かった。また、Intestinal typeでは腺管構造のapical側に濃縮して認められたのに対して、Diffuse typeでは細胞全体にびまん性に分布していることが確認された。intestinal typeの前癌病変とされる腸上皮化生でも10例中9例で陽性を示した。他の腸型ムチン(MUC2,CD10)が腸上皮化生では同様に高い陽性率を示しながら、胃癌では陽性率が20-30%と低下することも明らかになり、MUC13は単なる腸分化マーカーではなく、intestinal type胃癌の発癌に関与する分子であることが示唆された。本研究によりMUC13が胃癌の発癌、診断、治療に重要な分子であることが強く示唆された。

This study aims to analyze and extract the genetic material of gastric cancer surgical specimens. MUC13 is the most recently identified membrane penetrating protein;(1) MUC16 is the antigen of CA125; and (2) MUC1 is the target of antibody therapy in clinical trials. The presence of MUC13 protein in all cell lines except for the full-length 200kDa protein was the most frequent and the presence of the fragment was the most probable indicator of MUC13 diagnosis. Western blotting was performed in non-cancerous tissues compared with normal gastric tissues. Immunohistochemical analysis of MUC13 showed positive in small intestine and large intestine, but negative in normal gastric mucosa. Tissue array was used in 114 cases of gastric cancer, 74 cases (65%) of gastric cancer were positive, Diffuse type was higher than intentional type. The apical side of the glandular structure is concentrated and the Diffuse type is distributed throughout the cell. Intestinal metaplasia was detected in 9 out of 10 cases. Other intestinal types (MUC2, CD10) have the same high positive rate as intestinal metaplasia, gastric cancer has the same high positive rate as gastric cancer, MUC13 has the same high positive rate as gastric cancer, gastric cancer has the high positive rate as gastric cancer, MUC13 has the same high positive rate as intestinal differentiation, gastric cancer has the same molecular level as gastric cancer MUC13 plays an important role in the development, diagnosis and treatment of gastric cancer.

项目成果

Watanabe A, Hippo Y, Taniguchi H et al.: "An opposing view on WWOX protein function as a tumor suppressor."Cancer Research. 63・24. 8629-8633 (2003)

Watanabe A、Hippo Y、Taniguchi H 等人：“WWOX 蛋白作为肿瘤抑制因子的相反观点。”癌症研究 63・24 (2003)。

Shimizu H, Taniguchi H, Hippo Y, et al.: "Characterization of the mouse Abcc12 gene and its transcript encoding an ATP-binding cassette transporter, an orthologue of human ABCC12."Gene. 310. 17-28 (2003)

Shimizu H、Taniguchi H、Hippo Y 等人：“小鼠 Abcc12 基因及其编码 ATP 结合盒转运蛋白（人 ABCC12 的直系同源物）的转录本的表征。”基因。