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小胞体ストレス蛋白ORP150の急性肺傷害における関与の解明

阐明内质网应激蛋白ORP150在急性肺损伤中的参与

基本信息

批准号：
15790421
负责人：
栗林康造
金额：
$ 1.66万
依托单位：
Hyogo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

(目的)ORP150 (Oxygen-regulated protein)は種々の小胞体ストレスで発現する分子シャペロンであり,小胞体ストレスに対し,cytoprotective作用を有することが知られている。今回,我々はLPS惹起急性肺傷害マウスモデルを用い,in vivoにおけるORP150の効果について検討した。(方法)ORP150 transgenic (TG) mice及びwild type (WT) littermate (18-20g)に対し、LPS (20mg/kg)及びsalineを経静脈的に投与した24時間後に肺を摘出しLPS投与後の肺傷害を、下記にて評価した。(1)病理組織学的所見(H-E染色,TUNEL染色) (2)BALF中のLDH,総蛋白濃度 (3)肺組織中のMPO活性更に,ORP150の発現を免疫組織化学染色、ウェスタンブロット法にて検討した。(結果)(1)LPS投与後のWT miceでみられた肺傷害は、TG miceで軽減し、BALF中のtotal protein, LDH活性の上昇及びMPO活性の上昇は、全てTG miceにて有意に抑制された。(2)免疫組織化学染色ではsaline投与群と比較し,LPS投与後の肺組織にてORP150の発現増強を肺胞壁細胞に認め,TG miceではさらに強度の発現を肺胞壁細胞に認めた。(3)ORP150の発現を同定するために施行した上皮細胞のマーカーであるサイトケラチンとの蛍光二重染色にてORP150の大部分が肺胞上皮細胞に発現していることがわかった。(4)ウエスタンブロット法でもLPS投与にてORP150の発現増強を認めた。(5)TUNEL染色ではLPS投与後のWT miceにてTUNEL陽性細胞の増加を認めたが、TG miceにてその軽減を認めた。(結論)(1)ORP150はLPS投与にて肺胞上皮細胞に発現する。(2)ORP150はLPS投与による肺傷害を軽減するが、その機序の一つとして肺胞上皮細胞に対する抗アポトーシス作用が考えられた。

ORP150 (Oxygen-regulated protein) is a molecular inhibitor of cytoprotective effects on cell growth. Today, we are investigating the effects of LPS on acute lung injury. (Method)ORP150 transgenic (TG) rice and wild type (WT) littermate (18-20g) were administered intravenously with LPS (20mg/kg) and saline. (1)Pathological findings (H-E staining,TUNEL staining) (2) LDH and total protein concentration in BALF (3) MPO activity in lung tissue, and the appearance of ORP150 were examined by immunohistochemical staining and TUNEL staining. (Results)(1) After LPS administration, WT mice induced lung injury, TG mice decreased, total protein, LDH activity and MPO activity in BALF increased, and TG mice decreased. (2)Immunohistochemical staining showed that the expression of ORP150 in lung tissue increased after LPS administration, and the expression of TG in lung tissue increased. (3)ORP150 was detected in most of the lung epithelial cells by double staining. (4)It's a great way to increase the power of LPS and ORP150 (5)TUNEL staining was used to detect the increase of TUNEL positive cells in WT mice and the decrease of TUNEL positive cells in TG mice after LPS administration. (Conclusion)(1) ORP150 could not induce the expression of LPS in lung epithelial cells. (2) LPS 150 can reduce the lung injury, and the mechanism of lung epithelial cells can be examined.