慢性酸化ストレス負荷糖尿病性腎症モデルの作製及び解析

慢性氧化应激糖尿病肾病模型的制备及分析

• 批准号: 15790428
• 负责人: 楊 景堯
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790428/
• 关键词: 転写因子; Nrf2; 糖尿病; 酸化ストレス

糖尿病性腎症における酸化ストレスの役割を解明し、病態進行への関わりを検討するため、酸化ストレス関連転写因子であるNrf2のノックアウトマウスに糖尿病を発症させ,その経過を観察した。1.糖尿病性腎症マウスの作製(1)Nrf2ノックアウトマウス(KO群)と野生型マウス(wild群)それぞれ30匹にstreptozotocin(STZ)を投与し、糖尿病マウスを作製した。2.STZモデルの評価(1)糖尿病の評価。KO群とwild群の両群はSTZにて誘導以後、糖尿病を発症継続した。KO群は対照群とwild群に比べ、体重の減少が著しく、24週での体重は30.3g±3.6gを呈した(KO対照群38.8g±2.2g)(wild群とwild対照群:33.1g±3.7g、37.4g±2.9g)。また、KO群では50%生存率が24.4週とwild群の52.9週と比較し,著しく短縮し,死亡率の上昇が認められた(両群の対照群ではいずれも60週以上)。(2)腎障害の評価:両群の腎機能については,STZ投与前では有意差はなかったが,投与2週目では,血清クレアチニンがKO群では0.430mg/dlとwild群(0.293mg/dl)に比べ有意に上昇し,以後継続して上昇を呈した。以上よりKO群では糖尿病発症により体重減少など衰弱が進行し、生存率の低下、腎障害の進行が認められた。腎障害進行の原因検索のため、尿中のNO測定及びCarbamoyl-PROXYL(CP)用いたスピンプローブ法により体内酸化ストレス状態の評価を行った。その結果、STZ投与2週後において両群とも尿中NOx排泄量は増加し,KO群ではより顕著であった。また、スピンプローブ法によるin vivo ESR測定の結果では、wild群では投与後2週目にCP半減期が投与前より減少し3週目に延長に転じた。KO群ではこの変化は1週ずつ早く観察された。CP半減期の短縮は両群マウスともSOD全身投与により解消されたため、CP半減期短縮は、O_2^-を起源とする・OHの産生亢進がもたらしたと推察された。これは、ONOO^-の関与を示唆する結果となった。以上の結果より、KO群では、NO、O_2^-両者の産生亢進がwild群に比べ顕著であるため、ONOO^-と引き続く・OHの産生亢進による腎障害がwild群に比べ早期に出現したと推測される。現在、中長期のデータを確認し、これらを踏まえて学術雑誌に投稿の予定である。

Diabetic nephropathy is a disease that affects the understanding and development of diabetes mellitus. 1. Diabetic nephropathy (1) Nrf2 (KO group) and wild-type nephropathy (wild group) are treated with streptozotocin(STZ) and diabetic nephropathy (2). 2. STZ (1) KO group and wild group and STZ group after induction, diabetes mellitus The weight loss of KO group was 30.3g±3.6g (KO group 38.8g±2.2g) compared with wild group (wild group 33.1g±3.7g, 37.4g±2.9g). The survival rate of 50% in the KO and KO groups was 24.4 weeks compared with 52.9 weeks in the wild group, and the mortality rate was significantly higher than that in the KO and KO groups (> 60 weeks). (2)Evaluation of renal impairment: The renal function of the kidney group was significantly decreased before STZ administration, and the serum level of KO group was significantly increased after STZ administration for 2 weeks compared with wild group (0.293 mg/dl). The above KO groups are associated with weight loss, weakness, poor survival, and progression of renal impairment. The causes of renal impairment were investigated, NO in urine was determined and the status of Carbamoyl-PROXYL(CP) was evaluated by the method of "C-P". Results: After STZ administration for 2 weeks, urinary NOx excretion increased in the KO group, but decreased in the KO group. The results of ESR determination in vivo showed that the CP half-time decreased after 2 weeks and before 3 weeks. KO groupのCHANGE 1 week. CP half-life shortening, O_2-generation The results of this study were as follows: As a result, NO, O_2 and KO groups were hyperactive, and the kidney damage was predicted to occur in the early stage of the wild group. Now, in the medium and long term, we will confirm the contribution of the academic journal.