天疱瘡重症度を反映する単一エピトープELISA法の開発

开发反映天疱疮严重程度的单表位 ELISA 方法

• 批准号: 15790599
• 负责人: 長坂 武
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790599/
• 关键词: 天疱瘡; 単一エピトープELISA

最近我々が天疱瘡モデルマウスより単離した抗Dsg3モノクローナル抗体であるAK23、AK20、AK18は、それぞれDsg3細胞外領域N末端のV3・K7・P8・D59、Dsg3細胞外領域中央1/3、Dsg3細胞外領域C末端1/3がエピトープであり、またそれらのうちAK23が最も病的活性を示すことが確認されている。本年度はAK23のエピトープあるいはその近傍を認識する自己抗体が活動期天疱瘡患者血清中にどの程度存在するのかについて検討した。そこで我々はELISAプレート上の組換えヒトDsg3と患者血清とを反応後、AK23、AK20、AK18を添加し、Dsg3 ELISA値を測定した。その結果、粘膜優位型天疱瘡13/32例(41%)において、患者血清添加によりAK23のDsg3 ELISA値は50%以上減少した。一方、ほぼ全例において、患者血清添加によるAK20あるいはAK18のDsg3 ELISA値は50%以下の減少であった。以上より、天疱瘡モデルマウスにおいて機能上重要なエピトープであるDsg3細胞外領域N末端のV3・K7・P8・D59あるいはその近傍を認識する自己抗体が、40%以上の活動期天疱瘡患者に存在することが判明した。来年度以降は天疱瘡患者血清からDsg3特異的なアミノ酸残基に対する自己抗体のみを吸収除去し、新生仔マウスにおける水疱形成能の変化を検討する。またDsg3特異的なアミノ酸残基を有する点突然Dsg1分子を抗原としたELISA法を構築し、単一エピトープELISA値と個々の症例における重症度の相関関係についても検討する。

Recently, I have been using Pemphigus Pemphigus Anti-Dsg3 Pemphigus Antibody Antibody AK 23. AK20, AK18, Dsg3 extracellular domain N-terminal V3・K7・P8・D59, Dsg3 extracellular domain central 1/3, Dsg3 extracellular domain C-terminal 1/3 がエピトープであり、またそれらのうちAK23がmost disease activity をshows すことがconfirmationされている. This year, the AK23 のエピトープあるいはその near is recognized and the level of autoantibodies in the serum of patients with active pemphigus is present in the serum. The patient's serum was replaced with Dsg3 on the ELISA test, and after reaction, AK23, AK20, and AK18 were added, and the Dsg3 ELISA was measured. As a result, 13/32 cases (41%) of mucosal-topic pemphigus were found, and the patient's serum was reduced by more than 50% after adding AK23 Dsg3 ELISA to the patient's serum. One side, all cases of ほぼにおいて, patient serum added によるAK20あるいはAK18のDsg3 ELISA reduced であった below 50%. The above より, pemphigus モデルマウスにおいて functionally important なエピトープであるDsg3 extracellular domain N-terminal V3・K7・P8・D59 is an autoantibodies that is close to the patient and has been identified in more than 40% of patients with active pemphigus. The serum of pemphigus patients in the next year will be tested for Dsg3-specific anisodic acid residues. Antibodies can be absorbed and removed, and newborn baby's blisters can be transformed into blister. The amino acid residue specific to Dsg3 has a sudden Dsg1 molecule and the structure of the antigen is ELISA method. The correlation between the severity of the disease and the severity of the disease is related to the ELISA test.