双極性障害におけるミトコンドリアDNA多型と細胞内カルシウム動態の関連

双相情感障碍线粒体 DNA 多态性与细胞内钙动力学之间的关联

• 批准号: 15790643
• 负责人: 数野 安亜
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790643/
• 关键词: 双極性障害; ミトコンドリアDNA; カルシウム; サイブリッド; ミトコンドリアDNA多型; ヒスタミン

昨年度、核とミトコンドリアにratiometric-Pericam蛋白質(カルシウム濃度依存的に吸収波長が変化する蛍光蛋白質でカルシウム濃度の定量が可能であり、この蛋白質を導入した細胞で細胞質とミトコンドリアのカルシウム濃度が別々に測定できる)をミトコンドリア遺伝子が破壊されたρ^0206細胞(Osteosarcomaのcell lineである143B.TK^由来細胞を数ヶ月間、低濃度のエチジウムブロマイド存在下で培養することで作製)に恒常的に共発現させた細胞を作製した。また、3省合同のゲノム倫理指針対応の理化学研究所・脳科学総合研究センターにおける倫理委員会承認のもと、双極性障害患者及び正常被験者に口頭及び書面にて研究の意義、方法を十分に説明し、同意を得た上で採取した末梢血から血小板を分離し、上記の細胞とポリエチレングリコール存在下で融合させ、ハイブリッド細胞(サイブリッド)を作成した。今年度は、上記のようにして作製された36人分のサイブリッドについて、カルシウムレシオイメージングシステムを用いて、ヒスタミン刺激性のミトコンドリア内及び細胞質内のカルシウム濃度の測定、タイムラプス画像解析を行った。また、各サイブリッドが持っているミトコンドリアDNA多型について、各多型ごとに細胞質とミトコンドリアのカルシウムレベルの比較を行った。これらの解析より、双極性障害と関連が報告されているミトコンドリアDNA多型10398が、静止時におけるミトコンドリアのカルシウムレベルに影響を与えていることがわかった。また、histamine刺激における細胞質のカルシウム反応には別のいくつかのミトコンドリアDNA多型が関連していることもわかった。

A ratiometric-Pericam protein is a protein that can be used to control the growth of human beings. The concentration-dependent absorption wavelength changes, and the quantitative determination of protein concentration is possible. The protein was introduced into the cytoplasm of the cells, and the concentration of the protein was determined.(Osteosarcoma cell line is 143B.TK^derived from cells cultured for several months in the presence of low concentrations of osteoblasts). The ethics committee recognized the significance and methodology of oral and written research on bipolar disorder patients and normal subjects. The ethics committee approved the adoption of peripheral blood platelet separation and fusion in the presence of cells. The first step is to make sure that you have the right information. This year, the above-mentioned system was used to determine the concentration of 36 different species in the cytoplasm and cytoplasm, and to analyze the profile of 36 different species. A comparison of DNA polytypes in the cytoplasm of each genotype was made. The analysis results show that the bipolar barrier is related to the DNA polytype 10398 and the effect of the bipolar barrier is related to the DNA polytype 10398. DNA polytypes are associated with cytosol and cytosol in response to histamine stimulation.