卵巣明細胞腺癌の細胞生物学的特性の解明と抗癌剤耐性克服の試み

阐明卵巢透明细胞腺癌的细胞生物学特性并尝试克服抗癌药物耐药性

• 批准号: 15790889
• 负责人: 大石 徹郎
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790889/
• 关键词: Ovarian cancer; Clear cell carcinoma; Galectin-3

卵巣明細胞腺癌由来細胞株HAC-2,RMG-I,RMG-II,KK,KOC-7c,OVAS,OVISE,OVSAYO,SMOV-2を用いて,以下の検討を行った.cDNAマイクロアレイを用い,漿液性腺癌細胞との比較から明細胞腺癌に特有の遺伝子発現プロファイルを検討した.明らかな発現の増強もしくは減弱が認められる遺伝子を検索した.検索の結果から選択した遺伝子について、RT-PCR法により遺伝子発現を確認した.さらにWestern blot法による蛋白発現の検索,フローサイトメトリーによる細胞増殖の検討を行った.次に卵巣明細胞腺癌症例のパラフィン包埋ブロックを用いて上記遺伝子の発現を免疫組織化学により検索するとともに,Ki-67染色を行い細胞増殖との関連について検討した.cDNAマイクロアレイの結果,明細胞腺癌で3倍以上の発現増強がみられた遺伝子はgalectin-3,IL-9R,laminin-alpha,E-selectin,VHLおよびMUClであり,3倍以上の減弱がみられたのはP-cadherinとvitronectinであった.全ての明細胞腺癌細胞株でRT-PCR法によりgalectin-3遺伝子発現が認められ,Western blot法により蛋白発現が確認された.さらに蛋白発現強度とS期細胞比率との間に有意な相関を認めた.(r=0.724,p<0.05).免疫組織化学の結果,galectin-3蛋白発現は37例中18例(48.6%)にみられた.I-II期症例とIII-IV期症例との間でgalectin-3蛋白発現に差を認めなかった.Galectin-3蛋白発現陽性例のKi-67labelimg indexは陰性例と比して有意に高値を示した(27.3±3.2vs.15.5±3.8).以上の成績よりgalectin-3遺伝子が卵巣明細胞腺癌の細胞増殖に関与する可能性が示唆された.

Cell lines HAC-2,RMG-I,RMG-II,KK,KOC-7c,OVAS,OVISE,OVSAYO,SMOV-2 were used in this study.cDNA sequencing was used in comparison with serous adenocarcinoma cells. It's not easy to see the light coming out, but it's easy to see the light coming out. The results of detection include selection, detection, RT-PCR and confirmation of detection. Western blot analysis of protein expression, cell proliferation and protein synthesis. Next, the expression of gene expression was detected by immunohistochemistry in cases of human ovarian adenocarcinoma. Ki-67 staining was used to detect the correlation between cell proliferation and expression.cDNA staining showed that the expression of gene expression was increased by more than 3 times in cases of human ovarian adenocarcinoma. More than 3 times the attenuation of Galectin-3 gene expression was identified by RT-PCR and Western blot in whole cell adenocarcinoma cell lines. The intensity of protein expression and the ratio of S phase cells were significantly correlated with each other. (r=0.724,p<0.05). Galectin-3 protein expression was detected in 18 of 37 cases (48.6%) by immunohistochemistry. Galectin-3 protein expression was poor in stage I-II cases and stage III-IV cases.Galectin-3 protein expression was negative in Ki-67labelimg index (27.3± 3.2 vs. 15.5 ±3.8). These results indicate that galectin-3 gene expression is associated with the proliferation of human ovarian adenocarcinoma.

项目成果

Sato S.: "Activity of docetaxel in paclitaxel-resistant ovarian cancer cells."Cancer Chemotherapy Pharmacology. 53・3. 247-252 (2004)

Sato S.：“多西紫杉醇在紫杉醇耐药性卵巢癌细胞中的活性”。Cancer Chemotherapy Pharmacology 53・3（2004）。

Naniwa J.: "Leptomycin B enhances CDDP-sensitivity via nuclear accumulation of p53 protein in HPV-positive cells."Cancer Science. 94・12. 1099-1103 (2003)

Naniwa J.：“Leptomycin B 通过 HPV 阳性细胞中 p53 蛋白的核积累增强 CDDP 敏感性。”Cancer Science 94・12 1099-1103 (2003)。