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胎仔小腸細胞を用いた腸管再生の研究

利用胎儿小肠细胞进行肠道再生的研究

基本信息

批准号：
15791024
负责人：
米川浩伸
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Saitama Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

目的)前年度までの研究で細胞レベルまで分離した胎仔マウス小腸を培養によって小腸組織様構造を認める細胞塊に再構築しマウスの腹腔内の場所を変え移植を試みた。細胞塊は約2週間で完全に吸収されたが場所により吸収される時期が多少異なり腸管壁、腸間膜、肝表面で比較すると肝表面の細胞塊の吸収が遅かった。このため吸収された原因の一つとして細胞塊がしっかりとした支持組織が無いことが原因の一つと考えて支持組織の代用としてバイクリルメッシュ(polyglactin910)を用いて細胞培養を行い細胞塊とメッシュの合成物を形成し移植の実験を行った。材料と方法)胎齢16日の胎児マウスの空腸から回腸までの小腸を摘出細切した。細切した小腸は0.1%コラゲナーゼディスパーゼを用いて37℃、60分間の消化を行い細胞単位に分離した。1000回転15分間の遠心を行い高濃度細胞浮遊液を作った。培養皿の中に置いたステンレスメッシュの上にメンブレンフィルターをのせさらにその上にあらかじめコラーゲンゲルを浸透させたバイクリルメッシュ(polyglactin910)を置いてメッシュ上に高濃度細胞浮遊液を101ずつにスポットした。その後20%胎児牛血清を含む培養液を加え37℃,5% CO2の条件下培養を行った。約1週間の培養によって形成された細胞塊とバイクリルメッシュの合成物をマウスの腹腔内に移植し経日的に標本を摘出組織学的検討を行った。結果とまとめ)マウスの腹腔内に移植目的で置かれたバイクリルメッシュと細胞塊の合成物は約1週間で萎縮し約2週間でバイクリルメッシュを残し完全に吸収された。このためバイクリルメッシュと細胞塊のマウス腹腔内への生着をクリアする条件として強度ばかりでなく血流などの細胞塊への栄養が不可欠である可能性が示唆された。

Objective: To study the cell culture and culture of fetal small intestine in the past year, to recognize the structure of small intestine tissue, to reconstruct the site of abdominal cavity and to try to transplant it. The cell mass was completely absorbed into the intestinal wall, intestinal membrane and liver surface within about 2 weeks. The reason for this is that the cell mass is not supported by the support tissue. The reason for this is that the support tissue is replaced by the support tissue (polyglactin910). The cell mass is formed by the composite and transplanted. Materials and Methods) The small intestine from the jejunum to the ileum of the 16th day fetus was extracted and finely cut. Small intestine 0.1% cut and digested at 37℃ for 60 minutes 1000 minutes back and 15 minutes away from the center of the line, high concentration of cell suspension is used. In the culture dish, the medium temperature is changed to the medium temperature, and the medium temperature is changed to the medium temperature. In the culture dish, the medium temperature is changed to the medium temperature, and the medium temperature is changed to the medium temperature. In the culture dish, the medium temperature is changed to the medium temperature, and the medium temperature is changed to the medium temperature. After 20% fetal bovine serum was added to the culture medium, it was cultured at 37℃ and 5% CO2. A histological study was conducted on the formation of cell mass and the synthesis of cell mass in culture for about 1 week, and on the extraction of cell mass and cell mass in intraperitoneal transplantation. The results showed that the composition of the cell mass shrank in about one week and completely absorbed in about two weeks. The conditions for the development of cell mass in the abdominal cavity and the intensity of blood flow indicate the possibility of cell mass development.