扁平上皮癌細胞における転写抑制因子Snailの発現とその作用

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Snailはヒト胚発生において上皮-間葉系移行(EMT)に関連する転写因子として同定されたが、近年、細胞間接着分子のひとつであるE-カドヘリンの抑制因子としても作用することが明らかとなった。本研究では、扁平上皮癌(SCC)細胞におけるSnailの発現とその作用を検討した。Snail高発現SCC細胞ではE-カドヘリンの発現が低下しており、形態は線維芽細胞様形態を呈していた。タイプIコラーゲンを用いた再構成三次元培養およびマトリゲルを用いたインベージョンアッセイでは、Snail高発現SCC細胞は低発現細胞に比べて高い浸潤能を示した。多くの癌細胞では細胞外基質分解酵素(MMP)の発現が上昇しており、浸潤との関連が報告されているが、snail高発現SCC細胞ではMMP-2の発現が上昇していた。Snail低発現SCC細胞にSnailを強制発現させたところ、E-カドヘリン発現の低下、MMP-2発現の上昇、浸潤能の上昇、細胞形態の変化が認められ、これらの細胞生物学的特徴はSnailによって誘導されていることが明らかとなった。各種サイトカインがSnailの発現に与える影響を検討した結果、Snail低発現SCC細胞の転写活性はb FGF、TGF-βにより低下し、HGF、IGF-Iにより上昇した。Snail高発現SCC細胞の転写活性はb FGF、HGF、IGF-Iにより低下し、TGF-βにより上昇した。Snail転写開始点より-954〜+46bpプロモーター領域をルシフェラーゼアッセイにて解析した結果、TGF-βによるSnail発現促進には-954〜-407bp領域の関与が示唆された。TGF-βをはじめとするこれらのサイトカインは、SCC細胞に対してパラクラインあるいはオートクラインに作用しており、Snailとの関係を解明することはSCCの制御に有用であると考えられる。