遺伝子発現抑制細胞を用いた植物のシグナル伝達系の解析

使用基因表达抑制细胞分析植物信号转导系统

• 批准号: 04F03316
• 负责人: 澁谷 直人 (2005)
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Meiji University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F03316/
• 关键词: イネ; シロイヌナズナ; ホスホリパーゼD; エリシター; RNAi; シグナル伝達; 活性酸素応答; キチンオリゴ糖; 防御応答; PLD

我々はこれまで生化学的手法により、エリシターによる防御応答誘導過程においてホスホリパーゼD(PLD)が重要な役割を果たしていることを示してきた。今回の研究ではこの過程に関わるPLD遺伝子を明らかにするため、それぞれのPLD遺伝子をノックダウンしたイネ細胞を用いてエリシター応答を解析した。当初、アンチセンス法によりイネPLDαの発現を抑制した細胞を用いてエリシター応答を解析したところ、非形質転換体と差異が認められなかったため、イネゲノム中に存在する8個のPLD遺伝子全てについてノックダウン型形質転換体を作出することとした。このため、それぞれの遺伝子に固有の配列を組み込んだRNAi用ベクターを作製し、形質転換を行った。これらの形質転換細胞について遺伝子発現抑制の程度を評価したところ、イネの8個のPLD遺伝子中、6個について顕著に遺伝子発現が抑制された細胞系を得ることができた。残る2種のうち、1つについては遺伝子発現そのものが確認されていないため、対象外とした。これらについてエリシター処理後の活性酸素応答を調べたところ、特定のPLD遺伝子発現抑制細胞において活性酸素応答の低下が認められた。今後、結果の再現性、エリシター応答性遺伝子発現への影響などを複数の系統について確認し、エリシター応答に関わるPLD遺伝子を特定する予定である。また、エリシターシグナル伝達過程の遺伝学的解析のため、シロイヌナズナ変異体のエリシター応答をハイスループットで解析する新たな実験系を開発した。この方法により各種のシグナル伝達系変異体、受容体関連遺伝子変異体について解析を進めた結果、キチンオリゴ糖エリシターの受容・伝達過程に関する新しい知見を得ることができた。

The method of biochemistry is to prevent and treat diseases. The present study is concerned with the analysis of PLD gene expression in human cells. In the first place, the method of generation of PLD alpha is used to suppress the occurrence of PLD alpha, and the method of generation of PLD alpha is used to analyze the non-qualitative transformation of PLD alpha. The method of generation of PLD alpha is used to detect the occurrence of PLD alpha. This is the first time that we've had a problem with this. The inhibition of gene expression was evaluated in 6 of 8 PLD genes. 2 kinds of After the treatment, the active acid response was regulated, and the specific PLD gene was produced to inhibit the active acid response of the cells. In the future, reproducibility of results, influence of response gene occurrence, identification of multiple systems, response to response, and identification of PLD gene are predetermined. A new system for the analysis of the genetic process of the genetic process is developed. This method involves the analysis of all kinds of information, including different types of information, receptor-related information, different types of information, and new knowledge about the process of information and communication.

项目成果

Elicitor-induced activation of phospholipases plays an important role for the induction of defense responses in suspension-cultured rice cells.

• DOI: 10.1093/pcp/pci065
• 发表时间: 2005-04
• 期刊: Plant & cell physiology
• 影响因子: 4.9
• 作者: T. Yamaguchi;E. Minami;J. Ueki;N. Shibuya

RERJ1, a jasmonic acid-responsive gene from rice endodes a basic helix-loop-helix protein.

RERJ1 是一种来自水稻的茉莉酸响应基因，内含一种碱性螺旋-环-螺旋蛋白。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Biochemical Biophysical Research Communications 325
• 作者: K.Kiribuchi;M.Sugimori;M.Takeda;T.Otani;K.Okada;H.Onodera;M.Ugaki;Y.Tanaka;C.Tomiyama-Akimoto;T.Yamaguchi;E.Minami;N.Shibuya;T.Omori;M.Nishiyama;H.Nojiri;H.Yamane
• 通讯作者: H.Yamane

Characterization and cDNA cloning of monomeric lectins that correspond to the B-chain of a type 2 ribosome-inactivating protein from the bark of Japanese elderberry (Sambucus sieboldiana).

单体凝集素的表征和 cDNA 克隆，该凝集素对应于日本接骨木 (Sambucus sieboldiana) 树皮中 2 型核糖体失活蛋白的 B 链。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Journal of Biochemistry 135
• 作者: MA Rojo;H Kaku;N Ishii-Minami;E Minami;M Yato;S Hisajima;T Yamaguchi;N Shibuya
• 通讯作者: N Shibuya

An efficient experimental system to study the elicitor-induced defense responses in Arabidopsis thaliana

研究拟南芥诱导子诱导的防御反应的有效实验系统

• 发表时间: 2005
• 期刊: Plant and Cell Physiology 46(supplement)(In press)
• 作者: P Albert;A Miya;K Hiratsuka;N Kawakami^1;N Shibuya^<1)>
• 通讯作者: N Shibuya^<1)>

Two rice GRAS family genes responsive to N-acetylchitooligosaccharide elicitor are induced by phytoactive gibberellins : Evidence for cross talk between elicitor- and gibberellin-signaling

对 N-乙酰壳寡糖引发子有反应的两个水稻 GRAS 家族基因由植物活性赤霉素诱导：引发子和赤霉素信号传导之间串扰的证据

• 发表时间: 2004
• 期刊: Plant Molecular Biology 54
• 作者: RB Day;S Tanabe;M Koshioka;T Mitsui;H Itoh;M Ueguchi-Tanaka;M Matsuoka;H Kaku;N Shibuya;E Minami
• 通讯作者: E Minami