成魚の透明メダカを使ったゲノムワイド突然変異生成による遺伝性疾患モデルの開発

使用成年透明青鳉鱼通过全基因组诱变开发遗传病模型

• 批准号: 04F04169
• 负责人: 若松 佑子
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F04169/
• 关键词: 透明メダカ; 変異体スクリーニング; 心臓肥大; 心房・心室逆位; 腎臓発生; 腎臓再生; 3Dイメージング; 心房・心室逆立

1)透明メダカを用いたENUミュータジェネシス平成16年度に行われた変異体スクリーニングでは、成魚期に表現型を示す優性突然変異体である可能性を持つF1世代が23個体単離された。このうち、15個体から次(F2)世代が得られた。今年度は、このF2世代を組織学的に解析した。一部の家系ではF3も同様に解析した。その結果、3家系において優性突然変異による表現型が確認された。EII-24-19の家系では、心臓肥大が見られ、これはメンデル遺伝した。EII-15-11およびEII-12-21の家系では、腎臓において、タンパク質滲出物、尿細管内の異所性細胞、ネフロン形成の延長をはじめとした種々の異常が観察された。さらに、F3世代の解析では2つの劣性突然変異を同定した。一つはEII-21-24の家系に見られたもので、体幹部の背腹軸形成が異常になり、腹側鏡像対称の体型を示す。背中には背鰭の代わりに尻鰭が存在する。この表現型は、既報のDa(double anal fin)突然変異体とよく似ている。もう一つの劣性変異は、成魚で「盲目」の表現型を示すEII-11-10の家系に見られた(27個体中6個体に表現型を確認した)。2)成魚の中腎発生孵化後1ヶ月から7ヶ月のメダカの腎臓を、パラフィン切片から3D再構築して、組織学的に解析した。これにより、メダカにおける糸球体形成は仔魚期から成魚期初期まで続くことが明らかとなった。ほとんどの糸球体は3ヶ月齢までに形成され、その後は糸球体数の有意な増加は見られない。また、メダカ成魚の片方の腎臓には約240の糸球体が存在し、腎臓全体に分布していることがわかった。糸球体数は性と体重(サイズ)に依存する。雄(237±52.69)では雌(183±41.02)よりも糸球体数が多い。糸球体は一旦形成されると、徐々にサイズが増していくようである。

1)In the 16-year period, there were 23 individuals in the F1 generation. 15 individual times (F2) generations. This year, the F2 generation was analyzed histologically. A part of the family is F3 and the same analysis. The phenotype was confirmed by the sudden change of superiority in 3 families. EII-24-19 is a family with a large heart and a large heart. EII-15-11 and EII-12-21 were examined for abnormalities such as kidney, urinary exudate, heterosexual cells in urine tubules, and prolongation of urinary tract formation. The analysis of F3 generation is different from that of F2 generation. A family of EII-21-24 was found to have abnormal dorsal axis formation and ventral mirror symmetry. The dorsal fin of the dorsal fin is replaced by the dorsal fin. The phenotype of this gene is Da(double anal fin). The phenotype of EII-11-10 was identified in the family (6 out of 27 individuals). 2)The kidney of adult fish was developed 1 month after hatching, and the kidney was reconstructed by 3D and histological analysis. In the early stages of the adult fish stage, the globule is formed. The number of balls in the ball is increased intentionally after the ball is formed. About 240 pieces of the kidney are distributed in the whole body. The number of spheres depends on the weight. Male (237±52.69) and female (183±41.02). Once the ball is formed, it will be released.