大腸菌のストレス応答におけるシグマE因子の機能とその食品殺菌における意義

sigma E因子在大肠杆菌应激反应中的作用及其在食品灭菌中的意义

• 批准号: 04F04442
• 负责人: 土戸 哲明
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kansai University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F04442/
• 关键词: シグマE因子; 大腸菌; 食品殺菌; ストレス応答

本研究では、大腸菌をモデル微生物として食品の低温加熱殺菌(パスツリゼーション)処理後の生存や殺菌処理耐性に強く関わるとみられる細胞のストレス応答システムについて、その細胞表層の損傷の再生・修復のために作動するRpoE(σ^E)制御系の機能を解析して細胞の熱耐性、熱抵抗性への寄与を明らかにするとともに、微生物の熱耐性の変動要因を解明することを目的としている。まず、シグマE因子活性をβガラクトシダーゼ活性によって測定できるよう、rpoE遺伝子からプロモーターとrbs遺伝子を除去し、lacZと融合したRpoE::lacZ融合プラスミドを構築した。さらに、大腸菌のrpoE欠損株におけるシグマE因子発現活性を追跡するため、pdegP-lacZオペロン融合をレポーター遺伝子として構築した。これらのプラスミドで大腸菌MC4100rpoE::frt Km^r株を形質転換し、その後の実験に用いた。シグマE因子発現促進の効果は、一般に病原菌を制御するために利用される抗菌性薬剤に対する感受性化の程度を決定することによって調べた。その結果、シグマE因子高発現によって陽イオン性界面活性剤よりも陰イオン性界面活性剤の方に効果がみられ、SDS(ドデシル硫酸ナトリウム)に対するMIC(最小発育阻止濃度)は対象のそれと比較して400倍高かった。rpoE欠失は陰イオン界面活性剤に対する抵抗性が低下した。これらの差は、rpoEに依存する何らかの遺伝子が抗菌剤に対する細胞の完全防御機能に必要であることを示唆するものである。RpoEに対する必要性の特徴のために、rpoE遺伝子欠失株は生育にその何らかの抑圧が必要と推察され、rpoE制御下のいくつかの必須遺伝子が知られているが、抑圧変異はまだ見出せていない。

In this study, we studied the effects of low temperature heating on food and microorganisms.(2) Analysis of the function of the control system of RpoE(σ^E) in the regeneration and repair of damage to the cell surface after treatment, and analysis of the function of the control system in the heat tolerance and heat resistance of the cell. The key factors of microbial thermal tolerance are explained. RpoE: :lacZ fusion protein was constructed by removing rpoE: :lacZ fusion protein from rpoE::lacZ fusion protein. In addition, the gene expression activity of E factor in E. coli was traced, and the gene expression of E factor was constructed. The E. coli MC4100 rpoE::frt Km^r strain was transformed and used in the future. The development of E factor can be used to control the susceptibility of common pathogens. As a result, the E factor was found to be higher than that of the negative surfactant, and the MIC of SDS was 400 times higher than that of the negative surfactant. RPOE is not suitable for low resistance due to low interfacial activity. The difference between the two depends on how the gene is transmitted to the cell for complete defense function. RpoE is the essential characteristic of the plant, rpoE is the essential characteristic of the plant, rpoE is the essential characteristic of the plant, rpoE is the essential characteristic of the plant.