权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

モーター分子KIF1Aの分子遺伝学的研究

运动分子KIF1A的分子遗传学研究

基本信息

批准号：
04F04658
负责人：
廣川信隆
金额：
$ 0.77万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F04658/
关键词：
モーター分子キネシン KIF1A ジーンターゲテイングハイポモルフ

项目摘要

細胞内の多種類のオルガネラはこれらのモーター分子によって各々決められた場所へ輸送されていると考えられる。この機構を解明することは細胞生物学における非常に重要な課題である。私はそのための有力な方法のひとつとして、ジーンターゲテイング法を用いて変異マウスを作製し、得られたマウスを細胞生物的手法によって解析している。神経系に特異に発現するユニークなモノマー型順方向性モーター分子KIF1A遺伝子欠損マウスは、生後24時間以内に全て死亡したことが、これまでの我々の研究室の従来型のノックアウトの結果より明らかになっている。これらの遺伝子の機能をさらに発生・分化が進んだ段階の組織・細胞において解析するために、KIF1Aハイポモルフマウスを作成し、その解析することを通じて、KIF1Aの生体内での機能についての知見を得ようと試している。KIF1AのPH domainはトランスファーベクターに挿入し、組み替え得たウイルスを増幅して培養細胞に感染させ、KIF1Aの抗原を大量に産生させました。さらに抗体の精製を完成し、精製した抗体を用い、免疫沈降実験を行った。沈降した物質中に、Trkという神経栄養因子神経細胞での物質輸送のカーゴ分子の一つと考えられる。培養細胞では、TrkとKIF1Aのcolocalizationも発現した。TrkがDRGの細胞内に存在している、KIF1Aハイポモルフマウスは、功能障害のため、DRGの細胞が死になった。さらに、死にそうな細胞の中で、Trk抗体で染まるものがたまっていることも発現した。電子顕微鏡でたまっているものをはっきり観察した。Trk signalの下流であるリン酸化Erkとリン酸化Aktはsignalが弱くなった。今はモーター分子とカーゴ分子に蛍光蛋白を融合させ神経細胞にウィルスを用いて遺伝子導入し、モーター分子とcargoの動態を解析している。

A variety of intracellular proteins are produced in response to molecular responses to cellular responses. This mechanism is a very important topic in cell biology. A powerful method for the analysis of cellular biology. The gene KIF-1A gene was found to be defective within 24 hours after birth, and all the cells died within 24 hours after birth. The function of KIF1A gene is to develop, differentiate, progress, and analyze the tissue and cell at different stages. The function of KIF1A gene in vivo is to develop, analyze, and understand. KIF-1A PH domain name is used to detect the presence of KIF-1A antigen in cultured cells. The purification of antibodies is completed, the purification of antibodies is carried out, and the immune sedimentation is carried out. In the deposition of substances, Trk, neurotrophic factors, neurocellular substances transport, molecular transport, etc. Colocalization of cultured cells was observed. Trk is present in DRG cells, KIF1A is dysfunctional, DRG cells are dead. In the middle of the cell, Trk antibody was detected. The electronic microscope is used to detect the presence of the virus. Trk signal is weak. Now, molecules and proteins are fused into neurons, and molecules and cargo are analyzed dynamically.