神経細胞内でIP3受容体結合タンパク質による細胞内カルシウム制御

神经细胞中 IP3 受体结合蛋白对细胞内钙的控制

• 批准号: 04F04735
• 负责人: 御子柴 克彦 (2005)
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F04735/
• 关键词: IP_3; IP_3receptor; IRBIT; CPSF; Poly-adenylation; IP_3 receptor; poly-adenylation

我々は、IP_3レセプター(IP_3R)からIP_3によって遊離するIRBITが、mRNAのpoly-adenylationに必須の分子群であるCPSFに結合すること、4種類のCPSFサブユニットのうち、160 kDa CPSFサブユニットに特異的に結合する事をすでに報告した。本年度、我々は、IRBITとCPSFとの結合が、生理的な文脈でmRNA polyadenylationの調節に関与している事を、細胞質mRNA polyadenylationの最も優れたアッセイ系であるアフリカツメガエル(xenopus)の卵母紳胞の系を用いて検討した。まず、実際にIRBITが卵母細胞で発現している事を確認する為に、卵母細包から、xenopus IRBITのcDNA cloningを試みた。その結果、xenopus卵母細胞に3種類の異なるIRBITが存在する事が判明した。また、蛋白質レベルでの発現を確かめる為、それぞれに対する特異的抗体を作製したところ、蛋白質としてもIRBITが卵母細胞に発現しており、卵母細胞の成熟に伴ってリン酸化レベルが変化する事が判明した。更に、IRIBTのアンチセンスを注入した卵母細胞では、その成熟が遅延する事も判明した。以上の事から、IRBITが生理的な文脈でもmRNAのpolyadenylationにCPSFと共に関与している可能性が示された。今後、更なるその制御機構の解明が必要である。

I 々 は, IP_3 レ セ プ タ ー (IP_3R) か ら IP_3 に よ っ て free す る IRBIT が, mRNA の poly real - adenylation に must の molecular group of で あ る CPSF に combining す る こ と, 4 species の CPSF サ ブ ユ ニ ッ ト の う ち, 160 kDa CPSFサブユニットに special に combined with する events をすでに report た た. This year, I 々 は, IRBIT と CPSF と の combining が, physiological な context で mRNA polyadenylation の adjust に masato and し て い る を, cytoplasm mRNA Polyadenylation の も most optimal れ た ア ッ セ イ department で あ る ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル (xenopus) の oocyte gentlemen and cell の is を with い て beg し 検 た. ま ず, be interstate に IRBIT が oocytes で 発 now し て い る を sure す る に, oocyte fine package か ら, xenopus IRBIT の cDNA cloning を try み た. Youdaoplaceholder0 そ results: xenopus oocytes に3 species are <s:1> different なるIRBITが present する events が determine that the results are た. ま た, protein レ ベ ル で の 発 を now really か め る for, そ れ ぞ れ に す seaborne る specific antibody を cropping し た と こ ろ, protein と し て も IRBIT が oocytes に 発 now し て お り, oocyte の に with mature っ て リ ン acidification レ ベ ル が variations change す る matter が.at し た. More に, IRIBT の ア ン チ セ ン ス を injection し た oocytes で は, そ の mature が 遅 delay す る matter も.at し た. Above の matter か ら, IRBIT が physiological な context で も mRNA の polyadenylation に CPSF と altogether に masato and し て い る possibility が shown さ れ た. In the future, the なるそ <s:1> control body <e:1> will clarify that が is necessary である.