カタユウレイボヤの発生遺伝学-トランスポゾン挿入突然変異体の単離とその解析

海鞘发育遗传学-转座子插入突变体的分离及其分析

• 批准号: 04J00873
• 负责人: 粟津 智子
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J00873/
• 关键词: 発生遺伝学; 挿入変異体; カタユウレイボヤ; トランスジェニックライン; エンハンサートラップ; エンドヌクレアーゼ

前年度の研究より実証された、トランスポゾンMinosを用いたカタユウレイボヤにおけるエンハンサートラップ技術をさらに応用すべく、研究を行った。まずはエンハンサートラップ用のMinosベクターを改良し、それをホヤ卵に導入することによって、エンハンサートラップ系統のホヤを新たに6ライン単離した。この中の1ラインは幼若体期より鰓裂において強いGFPの発現を示し、鰓のマーカーラインとして有用であると考えられた。さらには、魚類などにおいて応用されているエンドヌクレアーゼI-SceIを用いたトランスジェニック体の作製技術をホヤにも応用し、この手法によって、エンハンサートラップ用のMinosベクターをゲノム中に大量に持つ系統のホヤを作製した。この系統のホヤにMinosの転移酵素mRNAを導入することにより、ゲノム中に存在するトランスポゾンが再稼動して、新たな挿入をゲノム中に持ち、異なるパターンでのGFPの発現を、様々な組織において示すエンハンサートラップ系統のホヤが大量に得られることが期待される。実験を行った結果、実際にそのような系統のホヤを複数得たので、詳細な解析および論文投稿の準備を進めつつある。また共同研究者との研究により、カタユウレイボヤ・セルロース合成酵素遺伝子(Ci-CesA)のプロモーター領域にMinosの挿入した、変態のタイミングに変異の表現型を示す挿入突然変異体のホヤを得たので、その検証結果をPNAS誌で発表した。

Previous year's research was carried out in the field of research and development. The system is designed to be used as a tool to improve the quality of products and services. In this case, the expression of GFP in the juvenile stage is very strong, and the expression of GFP in the juvenile stage is very useful In addition, fish and fish are used in the production of a large number of systems. The system contains Minos and its translation enzyme mRNA, which is expected to be introduced into the system in large quantities. The results of the implementation, the actual system, the detailed analysis and the preparation of the paper submission The co-investigators conducted research on the expression of Minos in the field of Ci-CesA and showed that the expression of Ci-CesA was different from that of Ci-CesA.

项目成果

An enhancer trap in the ascidian Ciona intestinalis identifies enhancers of its Musashi orthologous gene

• DOI: 10.1016/j.ydbio.2004.08.029
• 发表时间: 2004-11-15
• 期刊: DEVELOPMENTAL BIOLOGY
• 影响因子: 2.7
• 作者: Awazu, S;Sasaki, A;Sasakura, Y
• 通讯作者: Sasakura, Y

Minos transposon causes germline transgenesis of the ascidian Ciona savignyi.

米诺斯转座子导致海鞘海鞘种系转基因。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Development Growth & Differentiation 46(3)
• 作者: Matsuoka T;Awazu S;Satoh N;Sasakura Y.
• 通讯作者: Sasakura Y.