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動原体に普遍的なタンパク質Mis12の均等染色体分配における必須機能の解明

阐明着丝粒普遍存在的蛋白质 Mis12 在染色体均匀分离中的基本功能

基本信息

批准号：
04J01291
负责人：
清光智美
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

CENP-Aのセントロメア局在に必須な分裂酵母セントロメアタンパク質Mis18のヒトホモログhMis18の細胞内局在および、CENP-Aとの局在依存性を調べた。hMis18は分裂酵母同様、M期中期に動原体に局在せず、M期終期以降にセントロメア領域に局在することを見いだした。また、CENP-A RNAiではhMis18はセントロメアに局在したことから、ヒトhMis18がCENP-Aには依存せず局在することを示した。以上の内容はDevelopmental Cell誌に公表した。CENP-Aとは異なる経路で動原体構築、機能に必須な動原体タンパク質hMis12について、M期に物理的に相互作用する因子を質量分析により明らかにした。c20orf172,DC8,PMF1,AF15q14,HEC1,Nuf2,Spc25,Spc24,Bub1,BubR1,Bub3のcDNAをクローニングし、yeast two hybridによりこれらのタンパク質がどのように直接相互作用しうるか検討した。Bub1,BubR1がN末保存領域にあるTPR motifを介して、AF15q14と直接相互作用することを明らかにした。またTPR motifに変異を導入したBub1,BubR1ではBub1 RNAi, BubR1 RNAiの表現型を相補できないことを明らかにした。in vivoにおいてBub1,BubR1とAF15q14の相互作用がそれらの機能発現に必要であることが示唆された。Y2Hによる相互作用MAPとRNAiを用いた局在依存性の解析からhMis12はAF15q14を介してBub1/BubR1を動原体に局在させることが示唆された。以上の内容は現在投稿準備中である。

It is necessary for the CENP-A to divide the yeast in the cell, the Mis18 in the cell, the hMis18 in the cell and the CENP-An in the dependent cell. The division of yeast in hMis18 is the same as that in the middle stage of M phase. In the middle stage of M phase, the division of yeast is the same in the middle of M phase. CENP-A RNAi, CENP-A RNAi, hMis18, CENP-A, Dependencies, hMis18, Dependencies, Dependencies, etc. The above contents Developmental Cell the public table. CENP-A test results show that the pathogens and mechanisms must be tested in hMis12 cycles, and the interaction factors in M phase physics are analyzed by quantitative analysis. C20orf172 and AF15q14, HEC1, Nuf2, Spc25, Spc24, cDNA, BubR1, BubR1, BubR1 At the end of the Bub1,BubR1, you can save fields such as TPR motif, AF15q14, direct interaction, and so on. Enter TPR motif, Bub1 RNAi, BubR1 RNAi, table, table and table. In vivo is responsible for the interaction between Bub1,BubR1 and AF15q14. The mechanism is able to show that it is necessary to do so. Y2H interaction MAP RNAi in the dependence analysis of the hMis12 AF15q14 introduction to Bub1/BubR1 kinetogen, the bureau indicates the instigation of the agent. The above "content" is now in preparation for submission.