発生・生体維持における膜蛋白質メルトリンβ/ADAM19のリガンド産生機構の解明

阐明膜蛋白meltrin β/ADAM19在发育和生物维持过程中的配体产生机制

• 批准号: 04J01256
• 负责人: 横関 智一
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J01256/
• 关键词: ADAM19; Meltrin beta; Neuregulin; shedding; glial growth factor; aria; golgi apparatus; ADAM17; メルトリンベータ; グリア増殖因子; エクトドメインシェディング; メルトリンβ

メルトリンβは、受精や発生、様々な疾病への関与が知られるADAMファミリーに属するプロテアーゼである。申請者は、膜型グリア増殖因子の切断制御におけるメルトリンβの役割に関して以下の研究を行った。メルトリンβは初代培養神経細胞において、ゴルジ装置とその周辺に局在した。そこで蛍光相関分光法を利用し、メルトリンβが基質であるグリア増殖因子をゴルジ装置で切断することを、生きた細胞で捉えることを試みた。COS7細胞にメルトリンβとグリア増殖因子を共発現させ蛍光相関分光測定を行うと、ゴルジ装置でのグリア増殖因子の切断が観察され、それに対しプロテアーゼ活性を失った点変異体(EQ変異体)では、ゴルジ装置における切断が抑制される結果を得た。この結果は細胞内の逆行性膜輸送阻害薬(Bafilomycin A1)を用いても確認された。さらに、神経芽細胞およびCOS7細胞にメルトリンβとグリア増殖因子を共発現させ、密度勾配超遠心法によってゴルジ及び小胞体画分の成分の分離を行うと、確かにゴルジ画分にて基質が切断され、EQ変異体ではゴルジ画分における切断が抑制された。グリア増殖因子を切断するもう一つのプロテアーゼADAM17の欠損細胞でもメルトリンβによる基質切断はゴルジ画分で見られ、さらにADAM17はメルトリンβよりも軽い膜画分で基質を切断することが示唆された。以上から、メルトリンβはADAM17と時間的空間的に異なるリガンド産生制御に関与すると考えられた。癌細胞や再生過程では種々の膜型増殖因子の過剰発現や活性化が知られており、医療に繋がる有用な知見が得られたと考えられる

Pregnancy, fertilization, disease, ADAM, pregnancy, disease, disease, disease and disease. The applicant, the membrane type and the reproductive factor are cut off and controlled, and the following research is conducted. In the first generation, the gods were cultivated in the first generation, and the equipment was installed in the first generation. The method of photophase spectrophotometry is based on the use of β-amino acid, β-cell, β-cell and cell. The COS7 cell cycle is sensitive to β-phenotypic factors. The results show that the optical phase spectrophotometry is used to determine the proliferation factor, the device is used to cut off the colonization factor, and the device is used to detect the activity of the lost body (EQ body), and the device is used to detect the inhibitory effect. Results the intracellular retrograde membrane transport blockage (Bafilomycin A1) was confirmed by fluorescence microscopy. The components of microsomal drawing are separated from each other, make sure that they are separated from each other, make sure that they are separated from each other, and that EQ cells are separated from each other, and that EQ cells are separated from each other. The colonization factor was cut off. The ADAM17 cell was not cut. The cell was cut. The β-cell was cut. The base was cut. The picture was divided. The ADAM17 was cut. The film was cut. The above information is related to the amount of time available in the space of β-ADAM17. It is necessary to prepare and control the equipment and equipment. In the process of cancer cell regeneration, several kinds of membrane-type reproductive factors have been activated, and medical treatment has been proved to be useful.

项目成果

Meltrin β (ADAM19) mediates ectodomain shedding of Neuregulin β1 in the Golgi apparatus: fluorescence correlation spectroscopic observation of the dynamics of ectodomain shedding in living cells

• DOI: 10.1111/j.1365-2443.2007.01060.x
• 发表时间: 2007-03
• 期刊: Genes to Cells
• 影响因子: 2.1
• 作者: Tomoichi Yokozeki;S. Wakatsuki;K. Hatsuzawa;R. Black;I. Wada;A. Sehara-Fujisawa