卵丘細胞から分泌されるプロジェステロンの減数分裂再開能に関する研究

卵丘细胞分泌的孕酮恢复减数分裂能力的研究

• 批准号: 04J05263
• 负责人: 山下 泰尚
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J05263/
• 关键词: 減数分裂再開; 卵丘細胞; 膨潤; 性腺刺激ホルモン; EGF-like growth factor; Metalloproteinase; 排卵; 体外成熟培養; プロジェステロン; EGF様因子; プロスタグランディン; p38MAPK; cholesterol生合成経路; MAS; GVBD

近年,性腺刺激ホルモンの刺激によりEGF-like growth factor(Amphiregulin; AREG, Epiregulin; EREG)が順粒層細胞および卵丘細胞において発現し,EGF受容体を介してparacrine的あるいはautocrine的に卵丘細胞を刺激し,卵丘細胞の膨潤を誘起させることが報告された.AREG, EREGの分泌には,proteaseによる修飾が必要であるが,排卵過程において,AREGおよびEREGを切断・分泌させるproteaseに関する報告はこれまで全く無い.近年,マウスは胚性幹細胞においてADAM17IがAREGおよびEREGを細胞膜表面から切断させることが報告された.我々は,マウス卵丘細胞のマイクロアレイ解析からADAM17が排卵過程に発現していることを見出したことから,ブタ卵丘細胞卵子複合体(COCs)の体外培養系を用いて,卵丘細胞における詳細な役割を検討した.ブタCOCsをFSH+LH添加培地で培養し,ADAM17発現量と活性値を検出した結果,ADAM17発現は,培養10時間後から有意に増加し,40時間まで維持していた.活性値も同様の傾向を示した.FSH+LH添加培地にADAM17阻害剤(TAPI-2)を添加して培養すると,FSH, LHにより誘起される高い活性は,TAPI-2により完全に抑制され,AREGおよびEREGにより活性化されるERK1/2,卵丘細胞の膨潤が低下された.さらに,ラット順位層細胞(GC)に4dam]7siKNAを導入すると,Adam17siRNAは,FSHにより誘導されるERK1/2のリン酸化を抑制したこと,活性型AREGの添加によりその抑制は回復したことから,ADAM17の発現が,EGF-like growth factorを活性型へと変化させ,EGF受容体を刺激する結果,卵丘細胞の膨潤が誘起されることが明らかとなった.

In recent years, gonadal stimulation has stimulated EGF-like growth factor (Amphiregulin; AREG, Epiregulin; EREG) is produced in the cytoplasm of granulosa cells and cumulus cells. EGF receptor is mediated by paracrine and cumulus cells are stimulated. EREG secretion is modified by protease. AREG and EREG are not involved in the production of protease. In recent years, it has been reported that embryonic stem cells are cut off from the surface of cells. The in vitro culture system of cumulus cell-egg complexes (COCs) was developed by using ADAM17. ADAM17 was detected after 10 hours of culture and was maintained for 40 hours. FSH+LH addition to culture medium induced high activity of ADAM17 inhibitor (TAPI-2), but TAPI-2 completely inhibited activity of AREG and ERG, and decreased swelling of cumulus cells. In addition,ADAM17siRNA,FSH induced ERK1/2 phosphorylation, active AREG addition, inhibition,EGF-like growth factor activation,EGF receptor stimulation, cumulus cell swelling, and protein accumulation were induced by ADAM17 siRNA.

项目成果

Effects of adding luteinizing hormone to a medium containing follicle stimulating hormone on progesterone-induced differentiation of cumulus cells during meiotic resumption of porcine oocytes.

在含有卵泡刺激素的培养基中添加黄体生成素对猪卵母细胞减数分裂恢复过程中黄体酮诱导的卵丘细胞分化的影响。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Anim Sci J 75
• 作者: Michihiro Hirayama;Yakov Pesin;Michihiro Hirayama;Michihiro Hirayama;白石崇人;白石崇人;白石崇人;白石崇人;白石崇人;白石崇人;Yamashiro H;Yamashiro H;Yamashiro H;Wang HF;Yamashiro H;Shimada M;Yamashita Y;Shimada M;Shimada M;Shimada M;Shimada M
• 通讯作者: Shimada M

Enhanced freezability of goat spermatozoa collected into tubes containing extender supplemented with bovine serum albumin (BSA).

收集到装有补充牛血清白蛋白 (BSA) 的稀释剂的试管中的山羊精子的冷冻能力增强。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Reproduction and Development 52・3
• 作者: Michihiro Hirayama;Yakov Pesin;Michihiro Hirayama;Michihiro Hirayama;白石崇人;白石崇人;白石崇人;白石崇人;白石崇人;白石崇人;Yamashiro H;Yamashiro H
• 通讯作者: Yamashiro H

Effect of Semen Collection in Extender Solution on Characteristic of Goat Spermatozona.

稀释液中精液采集对山羊精子特性的影响。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Reproduction and Development 52・3(印刷中)
• 作者: Michihiro Hirayama;Yakov Pesin;Michihiro Hirayama;Michihiro Hirayama;白石崇人;白石崇人;白石崇人;白石崇人;白石崇人;白石崇人;Yamashiro H;Yamashiro H;Yamashiro H
• 通讯作者: Yamashiro H

Effect of semen collection in extender solution on the characteristics of goat spermatozoa.

稀释液中精液采集对山羊精子特性的影响。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Reproduction and Development 52・3
• 作者: Michihiro Hirayama;Yakov Pesin;Michihiro Hirayama;Michihiro Hirayama;白石崇人;白石崇人;白石崇人;白石崇人;白石崇人;白石崇人;Yamashiro H
• 通讯作者: Yamashiro H

Transcripts encoding the enzymes that convert acetyl-CoA to cholesterol are induced in cumulus cells and are essential for progesterone biosynthesis and meiotic resumption of porcine oocvtes.

编码将乙酰辅酶A转化为胆固醇的酶的转录物在卵丘细胞中被诱导，并且对于猪卵母细胞的孕酮生物合成和减数分裂恢复至关重要。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Japanese Journal of Reproductive Endocrinology 10
• 作者: Michihiro Hirayama;Yakov Pesin;Michihiro Hirayama;Michihiro Hirayama;白石崇人;白石崇人;白石崇人;白石崇人;白石崇人;白石崇人;Yamashiro H;Yamashiro H;Yamashiro H;Wang HF;Yamashiro H;Shimada M
• 通讯作者: Shimada M